點擊化學(xué)DBCO修飾蛋白/多肽/糖肽/小分子/抗體

點擊化學(xué)(Click chemistry)，又譯為"鏈接化學(xué)"、"速配接合組合式化學(xué)

二苯并環(huán)辛炔（ADIBO，DBCO）是用于應(yīng)變促進的炔疊氮化物環(huán)加成（spAAC）（一種無銅Click化學(xué)反應(yīng)）的最具反應(yīng)性的環(huán)炔。

這是一種胺反應(yīng)性NHS酯，可將反應(yīng)性部分輕松連接至幾乎任何伯或仲胺基團，例如蛋白質(zhì)，肽或小分子胺基團。

DBCO立即與疊氮化物反應(yīng)。該反應(yīng)速率遠(yuǎn)高于銅催化的反應(yīng)速率以及與許多其他環(huán)辛炔的反應(yīng)速率。與某些其他環(huán)辛炔不同，DBCO不與四嗪發(fā)生反應(yīng)-這允許疊氮化物與DBCO和反式環(huán)辛烯與四嗪進行正交共軛。

基于疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)的點擊化學(xué)，被廣泛應(yīng)用于有機化學(xué)、**化學(xué)、化學(xué)生物學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等多學(xué)科領(lǐng)域。銅催化疊氮-炔點擊化學(xué)反應(yīng)是一類**的生物正交反應(yīng)，但銅催化體系在生物體系中具有較差的生物相容性。環(huán)張力炔基如DBCO、BCN等可以在無銅催化的溫和條件下實現(xiàn)疊氮-炔基的環(huán)加成，**地促進了點擊化學(xué)在活生物體系中的應(yīng)用。

環(huán)張力炔基DBCO結(jié)構(gòu)可以在酸性條件下重排喪失其點擊化學(xué)反應(yīng)活性。通過研究發(fā)現(xiàn)，銀試劑AgNTf2或AgOAc可以在中性條件下促進DBCO快速重排生成四環(huán)產(chǎn)物，并且當(dāng)反應(yīng)體系有胺類化合物時，會發(fā)生轉(zhuǎn)酰胺反應(yīng)，形成新的酰胺產(chǎn)物。在此過程中，銀試劑催化轉(zhuǎn)酰胺反應(yīng)具有“籠縛”�；�試劑屬性：無催化劑條件下其�；�活性“束縛”在DBCO“籠狀”結(jié)構(gòu)中，而在銀催化下從“籠”中釋放其�；�能力。在與疊氮基團的競爭反應(yīng)中，銀試劑催化轉(zhuǎn)酰胺反應(yīng)效率遠(yuǎn)高于疊氮點擊化學(xué)反應(yīng)，�；�產(chǎn)物產(chǎn)率高達(dá)95%。我們選擇了不同的含有氨基的小分子化合物、多肽、糖肽、蛋白、糖蛋白等，對該反應(yīng)進行了底物反應(yīng)活性和選擇性的探索。

研究發(fā)現(xiàn)，銀催化條件下，DBCO可以快速的�；�氨基官能團；針對三種包含20種天然氨基酸的多肽底物的研究發(fā)現(xiàn)，DBCO�；�反應(yīng)高選擇性地發(fā)生在Lys的氨基上，而不影響其他氨基酸。同時，銀催化DBCO�；�反應(yīng)可以**地修飾糖肽、BSA蛋白、糖蛋白RNase B和IgG抗體等，表現(xiàn)出較好的底物適用性。

二：原理

點擊化學(xué)反應(yīng)主要有4 種類型

1.環(huán)加成反應(yīng)

2.親核開環(huán)反應(yīng)

3.非醇醛的羰基化學(xué)

4.碳碳多鍵的加成反應(yīng)

目前文獻(xiàn)報道廣泛應(yīng)用的點擊反應(yīng)(click reaction)是通過Cu ( Ⅰ ) 催化，炔基與疊氮基發(fā)生環(huán)加成反應(yīng)，生成區(qū)域選擇性的1,4-二取代-1,2,3-三氮唑，其反應(yīng)機理如圖 所示

三：反應(yīng)特征

1. 反應(yīng)原料容易得到

2. 對于氧氣、水不敏感

3. 產(chǎn)率相對較高

4. 產(chǎn)物的立體選擇性好

西安pg電子官方生物提供如下幾類DBCO偶聯(lián)試劑

DBCO胺反應(yīng)試劑和DBCO-PEG試劑：

DBCO-C6-NHS Ester           

DBCO-NHS Ester                 

DBCO-Sulfo-NHS Ester

DBCO-PEG4-NHS Ester            

DBCO-STP Ester

DBCO-PEG5-NHS Ester            

DBCO-PEG5-TFP Ester

DBCO Acid                    

DBCO-C6-Acid                  

DBCO-PEG5-Acid    

PC DBCO-NHS Ester  

DBCO Amine                   

DBCO-PEG4-Amine              

Sulfo DBCO-Amine  

Sulfo DBCO-PEG4-Amine

Bis-sulfone-PEG4-DBCO

DBCO Maleimide               

DBCO-PEG4-Maleimide    

Sulfo DBCO-Maleimide

Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG-MAL

DBCO-PEG-COOH

DBCO-PEG-NH2

DBCO-PEG-Biotin

DBCO-PEG-Silane

DBCO-PEG-SH

DBCO生物素反應(yīng)試劑:

Biotin-PEG4-DBCO    

WS Biotin DBCO   

Dde Biotin DBCO

Disulfide Biotin DBCO  

Desthiobiotin-PEG4-DBCO   

Diazo Biotin DBCO  

PC DBCO Biotin   

DBCO-Sulfo-Link-biotin

Disulfide Biotin DBCO

Desthiobiotin-PEG4-DBCO

Diazo Biotin DBCO

PC DBCO Biotin

WS Biotin DBCO 

DBCO-Sulfo-Link-biotin

Diazo Biotin-PEG3-DBCO

Dde Biotin-PEG4-DBCO

PC DBCO-PEG3-biotin

WSPC Biotin-PEG3-DBCO

N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHS

DBCO標(biāo)記熒光探針

BCO-Cyanine3

DBCO-Cyanine3.5

DBCO-Disulfo-Cyanine3

DBCO-trisulfo-Cyanine3.5

DBCO-Cyanine5

DBCO-Cyanine5.5

DBCO-Disulfo-Cyanine5

DBCO-trisulfo-Cyanine5.5

DBCO-Cyanine7

DBCO-ICG

DBCO-trisulfo-ICG

AFDye 405 DBCO   

AFDye 430 DBCO     

AFDye 488 DBCO     

AFDye 532 DBCO     

AFDye 546 DBCO    

AFDye 555 DBCO     

AFDye 568 DBCO      

AFDye 594 DBCO     

AFDye 647 DBCO    

Cy3 DBCO           

Cy5 DBCO          

Cy5.5 DBCO        

Cy7 DBCO           

MB 488 DBCO       

MB 543 DBCO     

MB 594 DBCO     

MB 660R DBCO        

MB 680R DBCO        

TAMRA DBCO        

小分子DBCO產(chǎn)品：

DBCO-PEG4-NHS Ester

DBCO-PEG5-NHS Ester

DBCO-PEG5-TFP Ester

DBCO-PEG4-Amine

Sulfo DBCO-PEG4-Amine

Bis-sulfone-PEG4-DBCO

Biotin-PEG4-DBCO

Desthiobiotin-PEG4-DBCO

DBCO-PEG4-DBCO

DBCO-PEG4-OH

DBCO-C4-COOH

Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG4-Maleimide

DBCO-PEG5-Acid    

DBCO-C6-Acid

DBCO-NHCO-PEG13-acid

DBCO-PEG8-NHS ester

DBCO-PEG2-PFP ester 

DBCO-C2-alcohol

DBCO-C2-PEG4-amine

DBCO-C3-PEG4-amine

DBCO-PEG1-NH-Boc

Bromoacetamido-dPEG???-amido-DBCO

Biotin-dPEG???-DBCO

Bromoacetamido-dPEG???-amido-DBCO

m-dPEG???-DBCO

DBCO-dPEG???-amido-dPEG???-DSPE

DBCO-dPEG???-MAL

DBCO-dPEG???-TFP ester

DBCO-dPEG???-meso-TP-IR775

N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHScas:2353409-72-8

N-DBCO-N-bis(PEG2-acid)    cas:2110449-00-6

N-DBCO-N-bis(PEG2-NHS ester)cas:2128735-29-3

DBCO-C6-Acidcas：1425485-72-8

DBCO-PEG5-Acidcas：1870899-46-9

DBCO Aminecas：1255942-06-3

DBCO-PEG4-Aminecas：1255942-08-5

DBCO Maleimidecas：1395786-30-7

DBCO-PEG4-Maleimidecas：1480516-75-3

溫馨提示：西安pg電子官方生物科技供應(yīng)的所有產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體。axc