外泌體標(biāo)記親脂性染料PKH-67(green)/PKH-26(red)
Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有**的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。
對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或活體示蹤,有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。
外泌體染色的方法。
親脂性染料:PKH-67(green)/PKH-26(red)
染料可以穩(wěn)定的與細(xì)胞膜脂質(zhì)區(qū)結(jié)合并發(fā)出熒光,主要用于細(xì)胞體外標(biāo)記、體外細(xì)胞增殖研究以及體內(nèi)外的細(xì)胞示蹤研究。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。
相比于PKH-67,PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期,標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。
將PKH67標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞外泌體與b.End3 細(xì)胞共培養(yǎng)后的熒光圖
親脂性羰花青染料(carbocyanine dyes):DiI/DiD/DiO/DiR
DiI, DiO, DiD, DiR是一系列親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。這些環(huán)境敏感性熒光染料在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。且具有消光系數(shù)高、極性依賴性、激發(fā)態(tài)壽命短等特點(diǎn)。一旦進(jìn)入細(xì)胞膜后,可在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,**濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。
將DiI標(biāo)記的外泌體注射入小鼠海馬齒狀回(DG)區(qū),分別觀察第3、6和20天的熒光結(jié)果,對(duì)比可以發(fā)現(xiàn)外泌體在皮質(zhì)層發(fā)生了很大的遷移。
DiD
將DiD標(biāo)記的外泌體與PC12細(xì)胞孵育3H后,共聚焦觀察。
DiR
體內(nèi)靜脈注射DiR標(biāo)記的外泌體,24H后進(jìn)行成像觀察,結(jié)果如上圖所示。
DiO
使用ExoChip-chambers捕獲不同樣品中的exosome,然后使用DiO進(jìn)行外泌體染色,通過(guò)觀察熒光的強(qiáng)弱對(duì)不同來(lái)源樣品中的外泌體進(jìn)行定量分析。
產(chǎn)品供應(yīng):
人骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞分泌外泌體
大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體(ADMSC-Exo)
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(mASCs)來(lái)源外泌體
聚乙二醇(PEG)沉淀法提取關(guān)節(jié)液來(lái)源外泌體
外泌體蛋白質(zhì)類微RNAs生物學(xué)標(biāo)記
外泌體核酸適配體脂質(zhì)體復(fù)合載藥系統(tǒng)
上述產(chǎn)品與相關(guān)檢測(cè)、分離、抽提等相關(guān)服務(wù)均可提供,僅用于科研機(jī)構(gòu)!
wyf 01.14