熒光染料PI（碘化丙啶）是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，常用于細胞凋亡檢測，英文全稱是Propidium Iodide。它是一種溴化乙啶的類似物，在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。盡管PI不能通過活細胞膜，但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用，

PI單染色法實驗步驟

1. 收集細胞{數(shù)目約（1~ 5）×106個/mL}，500 ~ 1000 r/min離心5min，棄去培養(yǎng)液。

2. 3ml　PBS洗滌1次。

3. 離心去PBS，加入冰預(yù)冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小時。

4. 離心棄去固定液，3mlPBS重懸5min。

5. 400目的篩網(wǎng)過濾1次，500—1000r/min離心5min，棄去PBS。

6. 用1ml　PI染液染色，4℃避光30min。

7. 流式細胞儀檢測：PI用氬離子激發(fā)熒光，激光光波波長為488nm，發(fā)射光波波長大于630nm，產(chǎn)生紅色熒光分析PI熒光強度的直方圖也可分析前散射光對側(cè)散射光的散點圖。

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