吉姆薩染色原理

吉姆薩染液是由天青與伊紅組成。各種細胞成分化學性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)，與酸性染料伊紅結(jié)合，被染成粉紅色；嗜堿性顆粒如細胞核蛋白或淋巴細胞胞漿為酸性物質(zhì)，與堿性染料美藍或天青結(jié)合，被染成紫藍色；中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結(jié)合，呈淡紫色。各類成分由于自身特性與吉姆薩染液中不同物質(zhì)結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色從而得以區(qū)分。吉姆薩染色液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色，胞漿染成粉紅色，在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細胞染色圖像。

染液配制

吉姆薩（Giemsa'sstain；天青-伊紅）染色

1、吉姆薩染料是伊紅(AzurIIEqsin) 和天青（藍）2號合成的。

2、吉姆薩染料（Giemsa,天青-伊紅）染液配制：

吉姆薩染料（粉末） 0.5g 或 7.5g

甲醇（ AR ） 33ml 或 500ml

甘油（ AR ） 33ml 或 500ml

先將吉姆薩染料放入乳缽中，逐漸倒甘油研磨溶于甘油中，置于 56℃水溫箱內(nèi)，90～120分鐘，然后加入甲醇，搖勻后放置數(shù)天，過濾后或不過濾即可使用。保存于棕色瓶中。一般兩周后使用為好。臨用時將貯備液與 pH 6.8的磷酸緩沖液按照 1:20混合。

染色步驟

1、將制備好的細胞涂片放置染色架上，滴加稀釋好的染色液使其覆蓋全部血膜，室溫染色15～30min。

2、用自來水緩慢從玻片一端沖洗 (注意勿先倒去染液或直接對血膜沖洗 )，晾干后鏡檢。

注意事項：

1、請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2、如果染色過濃或者過淡，請自行調(diào)整染色時間或吉姆薩工作液濃度。

3、原液稀釋后可能會出現(xiàn)少量沉淀，不影響使用；染色結(jié)束用水洗凈即可。

4、吉姆薩原液采用常規(guī)方法配制并用濾紙過濾，請在使用時不要接觸到水。否則時間長了會失效。

5、PH對細胞染色有影響。染色用載玻片必須清潔，無酸堿污染以免影響染色結(jié)果。

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以上內(nèi)容來自小編zzj 2021.1.22