西安pg電子官方生物科技有限公司是一家集工業(yè)生產(chǎn)，分子生物、生化試劑、常規(guī)試劑、常用耗材與進(jìn)口試劑代理生物科研公司，pg電子官方生物擁有一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)服務(wù)能力，產(chǎn)品鏈供應(yīng)完備，涉及有機(jī)金屬試劑、常用生化試劑、分子生物學(xué)試劑、分子生物學(xué)領(lǐng)域等相關(guān)產(chǎn)品、現(xiàn)我們提供定制產(chǎn)品葉酸靶向修飾納米紅細(xì)胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs產(chǎn)品，將制備方法總結(jié)如下：

本研究采用低滲裂解法及納米擠出工藝， 制備了葉酸和聚乙二醇共同修飾的納米紅細(xì)胞膜藥物載體， 并以此負(fù)載鹽酸阿霉素構(gòu)建了一種 具有長(zhǎng)循環(huán) 和藥物靶向雙重作用的新型納米**遞釋系統(tǒng)（FA/PEG-DOX-Nano-RBCs）。 該載藥系統(tǒng)利用了紅細(xì)胞膜的生物相容性， PEG 長(zhǎng)循環(huán)作用及葉酸配體的**識(shí)別靶向特性， 有望提高阿霉素的抗**藥效， 降低其毒副作用， 

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的制備流程圖如圖1所示,其具體操作過(guò)程如下:

（1） 壓積紅細(xì)胞的提取

大鼠眼眶靜脈叢取全血,4000 rpm離心10min棄去血漿和白細(xì)胞層，加入4倍體積預(yù)冷的 PBS溶液充分吹打，4000rpm離心10min棄上清，并重復(fù)上述操作3次，得到壓積紅細(xì)胞。

（2） 血影紅細(xì)胞（ghost）的制備

取1mL 壓積紅細(xì)胞， 加入4倍體積低滲0.25×PBS 溶液4 ℃孵育20 min （5 min 上下顛倒一次），6000rpm 離心10min，棄上清，再加入4倍體積低滲PBS溶液反復(fù)清洗直到上清無(wú)色， 制得血影紅細(xì)胞 。

葉酸配體修飾過(guò)程制備

取相同體積PBS配制的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE溶液加入上述制備的血影細(xì)胞中 ， 于37℃搖床上孵育1h，4000rpm離心5min去除游離FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE， 制得葉酸及PEG修飾后的血影紅細(xì)胞。

（4）FA/PEG-DOX-RBCs的制備

取1mL經(jīng)葉酸修飾的血影紅細(xì)胞，加入4倍體積一定濃度的DOX（溶于0.25×PBS） 溶液， 4℃條件下振搖孵育30min，加入計(jì)算體積的10×PBS濃縮液，室溫振搖孵育90min。 6000rpm 離心10 min， 棄上清，用 PBS 溶液洗滌三次，充分棄去游離 DOX， 加入 4 倍體積PBS溶液，混勻，得到 FA/PEG-DOX-RBCs混懸液。

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制備

取上述制備的 FA/PEG-DOX-RBCs 混懸液 5 mL，藥物用 20%功率探頭超聲5min， 其次采用脂質(zhì)擠出法使其依次通過(guò) 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 孔徑的 聚 碳 酸 酯 膜 21 次 ， 得 到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混 懸 液 。 將FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混懸液置于 5 mL 超濾離心管內(nèi)， 6000 rpm離心 10 min，甩去游離 DOX， 將超濾離心后得到的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 重新懸浮于 PBS溶液中， 4 ℃避光儲(chǔ)存于冰箱中備用。

西安pg電子官方生物提供各種動(dòng)、植物細(xì)胞膜，現(xiàn)將各種細(xì)胞膜展示如下：

大鼠Muller細(xì)胞膜凍干粉

大鼠卵巢顆粒細(xì)胞膜

大鼠嗅鞘細(xì)胞膜凍干粉

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞膜

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞膜

大鼠小腦顆粒細(xì)胞膜

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞膜凍干粉

大鼠滑膜細(xì)胞膜凍干粉

大鼠牙乳頭細(xì)胞膜

大鼠睪丸支持細(xì)胞膜粉末

大鼠肝卵圓細(xì)胞膜

大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞膜粉末

大鼠腎系膜細(xì)胞膜

大鼠腎足突細(xì)胞膜

大鼠胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞膜

小鼠上皮細(xì)胞細(xì)胞膜凍干粉

小鼠平滑肌細(xì)胞凍干粉

小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜凍干粉

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜

小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞膜粉末

小鼠腎成纖維細(xì)胞細(xì)胞膜

小鼠尿道上皮細(xì)胞細(xì)胞膜提取物

鼠輸尿管上皮細(xì)胞膜粉末

小鼠腎管狀上皮細(xì)胞膜分散液

小鼠心肌細(xì)胞膜凍干粉

小鼠成纖維細(xì)胞

小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞膜提取液

豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞膜凍干粉

豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞膜凍干粉

豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜粉末

雞肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞膜分散液

雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜分散液

雞胚成纖維細(xì)胞膜粉末

人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞膜粉末

細(xì)胞膜凍干粉-來(lái)源人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

人肺泡上皮細(xì)胞膜凍干粉

細(xì)胞膜分散液-人氣管上皮細(xì)胞膜凍干粉

細(xì)胞膜提取液-來(lái)自人支氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞膜分散液-人小氣道上皮細(xì)胞

細(xì)胞膜凍干粉-來(lái)源人肺成纖維細(xì)胞

人支氣管平滑肌細(xì)胞膜粉末產(chǎn)品

細(xì)胞膜剝離產(chǎn)品-來(lái)自人小氣道平滑肌細(xì)胞

人氣管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞膜粉末產(chǎn)品

IDDM患者紅細(xì)胞膜

番茄幼苗細(xì)胞膜

凋亡細(xì)胞細(xì)胞膜

自由基損傷紅細(xì)胞膜

野牛草細(xì)胞膜

豚鼠單個(gè)心室肌細(xì)胞膜

糖尿病大鼠腎皮質(zhì)細(xì)胞膜

大鼠肝細(xì)胞膜

小腸上皮細(xì)胞膜

沙棘葉片細(xì)胞膜

大鼠心房肌細(xì)胞膜

5-羥色胺1A(5-HT_(1A))受體細(xì)胞膜

海綿細(xì)胞膜

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜

羊肌纖維細(xì)胞膜

擬穴青蟹細(xì)胞膜

蠶豆葉細(xì)胞膜

巨噬細(xì)胞膜

心肌細(xì)胞膜

體外腸上皮細(xì)胞膜

奶牛酮病紅細(xì)胞膜

蟾蜍交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞膜

鋸緣青蟹細(xì)胞膜

染毒家兔紅細(xì)胞膜

溫馨提示：西安pg電子官方生物科技有限公司供應(yīng)的產(chǎn)品僅用于科研，不能用于其他用途，axc,2020.01.29