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          X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷的實驗手冊
          發(fā)布時間:2021-02-03     作者:yyp   分享到:

          名稱:X-Gal 5--4--3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

          其他名稱:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-

          galactopyranoside5--4--3-叼噪-α-D-吡喃半乳糖苷;X-α-D-Galactoside X-a-D-半乳糖苷

          規(guī)格:25mg

          運輸溫度:冰袋

          保存溫度:-20°C避光干燥

          **期:2

          應(yīng)用:α-半乳糖苷酶顯色底物

          產(chǎn)品描述:

          X-a-Gal (5--4-氯…-3-引味-α-D-吩喃半乳糖苷,CAS :107021-38-5),一種用來檢測α-半乳糖苷酶(也稱為蜜二糖酶,a~-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,EC 3.2.1.22)活性的顯色底物。X-a-Gal的使用,避開雙雜交分析中β-半乳糖苷酶溶液制備和濾膜提升實驗( filter-lift assay )/的繁瑣操作,只需直接添加在培養(yǎng)基上,通過藍色沉淀的生成與否,即可用來檢測雙雜交相互作用。X-a-Ga可用來區(qū)分腸桿菌科內(nèi)的不同物種以及劃分乳酸菌和雙歧桿菌。組織學研究中,X-a-Gali還可借助光學顯微鏡來檢測組織的α-半乳糖苷酶活性。

          利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作為碳源,酵母菌得以正常生長或進行發(fā)酵。釀酒酵母菌內(nèi),該酶由幾種GAL基因調(diào)控的MEL1基因所編碼。一旦GAL4款活,α-半乳糖苷酶分泌,之后水解培養(yǎng)基上的X-a-Gal,使得菌落產(chǎn)生藍斑。酵母雙雜交研究用的工程菌包括AH109,PJ69-2AY190Y187。

          我司(pg電子官方生物)提供兩種形式的產(chǎn)品,達分子生物學級,高純(>98%TLC) :

          一種以凍干粉形式提供。

          一種以溶于DMF的儲存液形式提供,濃度為20mg/M L。

          產(chǎn)品特性:

          1 ) CAS  : 107021-38-5

          2)化學名:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-a-D-galactopyranoside5--4--3-例除-a-D~吮喃半乳糖苷﹔X-a-D-Galactoside X-a-D-半乳糖苷;

          3)分子式:C14H15BrCINO6

          4)分子量:408.64g/mol

          5)純度:98% ( TLC)

          6)外觀:白色或近白色結(jié)晶粉末

          7)溶解性:溶于DMF ( 20 mg/ml )

          8)化學結(jié)構(gòu)式:

          image.png

          保存與運輸方法

          保存:粉末-20°C避光干燥保存,2年**。運輸:冰袋運輸。

          使用方法

          方法1∶直接倒入固體培養(yǎng)基

          溶解60mgX-α-gal3ml DMF20mg/ml儲存液,馬上使用或者避光儲存于-20°℃,6個月穩(wěn)定;將高壓滅菌好的瓊脂培養(yǎng)基于室溫冷卻至50C ;

          按照每升培養(yǎng)基加入1ml 20mg/mlX-α-gal儲存液的用量,直接加入冷卻好的瓊脂培養(yǎng)基﹔【若有需要,此時也可加入篩選用的抗生素】﹔倒平板,使用前必須讓培養(yǎng)基室溫凝固(通常至少需30min )。

          方法2∶涂布于預(yù)制培養(yǎng)平板上

          溶解24mg X-α-gal6ml DMF4mg/ml儲存液,馬上使用或者避光儲存于-20°C℃,6個月穩(wěn)定﹔超凈工作臺內(nèi)放置已經(jīng)倒好的固體培養(yǎng)基,使其表面干燥;

          吸取20Opul(15cm平板)10opl ( 10cm平板) 4mg/ml X-α-gal儲存液于預(yù)制培養(yǎng)平板上,并涂布使其均勻分散在表面【注意:平板邊絳通常很難得以充分涂布,可能導(dǎo)致假陽性克隆生成。建議條件可能下,于平板中央挑取克隆】。

          使用前將上述涂布好的篩選平板于超凈工作臺內(nèi),至少晾干30min ;

          將轉(zhuǎn)化好的細菌或酵母涂于平板上,分別置于37℃或30℃倒置培養(yǎng),直至藍色菌落出現(xiàn)。

          注意事項:

          為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

          供應(yīng)產(chǎn)品目錄:

          畢赤酵母MGYH平板

          畢赤酵母MGY平板

          畢赤酵母MMH平板

          畢赤酵母MM平板

          畢赤酵母PAD平板

          畢赤酵母RDH培養(yǎng)基

          畢赤酵母RDH平板

          畢赤酵母RD培養(yǎng)基

          畢赤酵母RD平板

          畢赤酵母篩選培養(yǎng)基套裝(PichiaPink表達系統(tǒng))

          剛果紅YPD平板(9cm)

          缺精氨酸APG培養(yǎng)基(含半乳糖,-Ura)

          EMMG培養(yǎng)基(含谷氨酸鈉)

          EMMS培養(yǎng)基(含山梨醇)

          EMM培養(yǎng)基(鈣鎂糖提供無菌母液)

          EMM培養(yǎng)基(過濾除菌)

          EMM培養(yǎng)基(需過濾除菌)

          SDC液體培養(yǎng)基(酵母衰老實驗)

          YE Agar Medium

          YE Medium

          YEP Agar Medium

          YEP Medium

          YEPM Agar Medium/YPM Agar Medium

          YEPM Medium/YPM Medium

          YES Agar Medium

          YES Medium

          YPDS Liquid Medium

          YPS Agar Medium/YEPS Agar Medium

          YPS Medium/YEPS Medium

          低糖EMM培養(yǎng)基

          酵母MM培養(yǎng)基/無機鹽培養(yǎng)基(2×)

          缺磷EMM培養(yǎng)基

          無糖EMM培養(yǎng)基

          yyp2021.2.3

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