通過在血紅蛋白封端的金納米團(tuán)簇（Hb @ AuNCs）溶液中進(jìn)行超聲處理，從石墨粉中合成了穩(wěn)定的石墨烯納米片，用于生物傳感應(yīng)用。這種方法是一種剝落和破碎納米簇溶液中石墨的簡易方法，使我們能夠以低成本生產(chǎn)穩(wěn)定的石墨烯水分散體，而無需使用危險(xiǎn)化學(xué)品或繁瑣的實(shí)驗(yàn)程序。在這種方法中，Hb @ AuNCs不僅可以通過非共價(jià)鍵用于石墨烯的穩(wěn)定，而且還可以用作多層石墨烯納米片的分散劑。Hb @ AuNCs穩(wěn)定的石墨烯（Hb @ AuNCs-G）可以在高分辨率透射電子顯微鏡（HRTEM），ζ-粒度儀和拉曼光譜觀察到特征。然后，基于“信號(hào)關(guān)閉”和“信號(hào)開啟”策略，將石墨烯納米片用作新穎的多功能電化學(xué)平臺(tái)，用于慢性髓性白血�。–ML）的短DNA物種的超靈敏生物傳感。

制備方法如下：

**通過一步綠色還原法從HAuCl4（2.5 mL，2.8 mM）中合成Hb @ AuNCs的，并在37°C下用Hb蛋白（2.5 mL，7.0 mg mL-1）進(jìn)行穩(wěn)定化。之后，在堿性條件下（pH?12.4）劇烈攪拌24 h，然后離心除去溶液中懸浮的或較大粒徑的顆粒。Hb @ AuNCs的代表性TEM圖像顯示在圖1A中。如圖所示，Hb @ AuNCs的平均大小約為5 nm。納米團(tuán)簇的粒徑還通過測定流體動(dòng)力學(xué)直徑（DH）來支持。DLS結(jié)果顯示平均DH為5.6±0.5nm。

接著在包含5 mM K3[Fe(CN)6] / K4[Fe(CN)6](1:1)/0.1 M KCl的Tris-HCl緩沖液（pH 7.0）中進(jìn)行EIS方法。下圖展示出了在修改步驟期間在GCE處的阻抗譜的奈奎斯特圖。裸露的GCE在高頻下表現(xiàn)出非常小的半圓（曲線a，Rct = 508Ω），表明系統(tǒng)具有良好的電子傳遞。當(dāng)AuNPs電沉積在GCE的表面上時(shí)，電化學(xué)半圓變得更小，接近一條直線（曲線b，Rct = 152Ω），這表明電極的電子轉(zhuǎn)移得到了改善。由于 [Fe(CN)6] 3- / 4-陰離子與帶負(fù)電的石墨烯之間的靜電吸引，導(dǎo)致Rct（曲線c，Rct = 1974Ω）。實(shí)際上，相對(duì)于裸露的GCE，Hb @ AuNC-G / AuNP / GCE的電荷轉(zhuǎn)移電阻的顯著增加證實(shí)了在納米復(fù)合材料表面上存在帶負(fù)電荷的羧基。當(dāng)pDNA鏈共價(jià)自組裝到納米簇上時(shí)，Rct值進(jìn)一步顯著增加（曲線d，Rct = 2397Ω）�？梢詺w因于以下事實(shí)：帶負(fù)電荷的DNA探針充當(dāng)靜電屏障，排斥[Fe（CN）6] 3- / 4-探針并阻礙其界面電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)。

由于可以通過改變傳感器制造中使用的pDNA濃度來控制探針密度，因此研究了該參數(shù)對(duì)所制備傳感器響應(yīng)的影響，結(jié)果如圖2A所示。正如所見，MB的吸收電流隨修飾電極表面上裝載的pDNA濃度增加至1 μM而增加。然而，由于電極表面的飽和和隨之而來的空間電阻，較高濃度的探針ssDNA導(dǎo)致MB信號(hào)減少。由于雜交時(shí)間是影響基因傳感器響應(yīng)的重要因素，因此還研究了該參數(shù)對(duì)傳感器響應(yīng)的影響。顯而易見的是，電流響應(yīng)隨著長達(dá)30分鐘的雜交時(shí)間的增加而迅速下降，然后在更高的時(shí)間段趨于平穩(wěn)，這表明電極表面dsDNA的形成已達(dá)到飽和水平。 

為了增加對(duì)基因傳感器的電化學(xué)性能的了解，在該電化學(xué)生物測定中研究了修飾電極的穩(wěn)定性。為此，將MB-pDNA / Hb @ AuNCs-G / AuNPs / GCE浸入Tris-HCl緩沖溶液（pH 7.0）中約15天，并保持在4℃，然后將DPV峰與初始電流相比，發(fā)現(xiàn)電流僅下降了3.1％，這顯示出可接受的穩(wěn)定性。將修飾電極保持在室溫（25℃）時(shí)在相同條件下連續(xù)15天，DPV峰值電流僅降低了8.7％。這種合理的穩(wěn)定性可能歸因于納米平臺(tái)的穩(wěn)定性以及pDNA序列與pDNA修飾電極表面的緊密附著。使用DPV技術(shù)研究了對(duì)不同DNA序列的基因傳感器特異性，如圖所示。

在目標(biāo)cDNA（0.1 pM）存在下，MB信號(hào)強(qiáng)度顯著降低，而在ncDNA（1.0 pM）和sbmDNA（1.0 pM）序列存在下，信號(hào)降低可忽略不計(jì)。實(shí)際上，ncDNA和sbmDNA的孵育顯示MBpDNA / Hb @ AuNC-G / AuNPs / GCE的伏安圖沒有顯著變化，表明沒有發(fā)生雜交。因此，可以得出結(jié)論，固定化的DNA探針與靶cDNA序列選擇性結(jié)合。另外，還觀察到了對(duì)單堿基錯(cuò)配的**區(qū)分。該觀察結(jié)果表明由于堿基錯(cuò)配，未完成完全雜交。結(jié)果證實(shí)了基因傳感器對(duì)HPV16 DNA序列的選擇性和特異性。

我們可以提供Au25納米團(tuán)簇/Au13納米團(tuán)簇/Au8納米團(tuán)簇/Au36(SR)24/Au15（SG）13//Au44(SCH3)28金納米團(tuán)簇等，并且我們可以提供官能團(tuán)修飾、蛋白修飾、酶修飾、DNA修飾、殼聚糖、多肽、葉酸等修飾偶連納米團(tuán)簇的定制合成技術(shù)。

相關(guān)產(chǎn)品

牛血清白蛋白(BSA)修飾的金納米團(tuán)簇(金簇)

非晶ZnO納米團(tuán)簇

銀原子納米團(tuán)簇

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鉑原子納米團(tuán)簇

Ni-La-B非晶態(tài)合金納米團(tuán)簇

Cu納米團(tuán)簇

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4H-SiC納米團(tuán)簇

Cu納米團(tuán)簇

CeO2納米團(tuán)簇

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鉑納米團(tuán)簇

銀、鈷和鉑原子納米團(tuán)簇

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Fe3O4團(tuán)簇的表面包覆一層氧化硅(SiO2)

核-殼結(jié)構(gòu)的Fe3O4@SiO2粒子

金屬(金、銀、銅)納米團(tuán)簇

銀硫簇基金屬有機(jī)框架

巰丙基-七異丁基倍半硅氧烷（POSS-SH）修飾銀硫納米團(tuán)簇

四氧化三鐵(Fe3O4)納米團(tuán)簇（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

金Au納米團(tuán)簇-（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

銀Ag納米團(tuán)簇-（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

銅Cu納米團(tuán)簇（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

鉑Pt納米團(tuán)簇（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

鈷Cu納米團(tuán)簇（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

AuNCs 金納米團(tuán)簇（氨基/羧基/PEG/BSA/溶菌酶修飾）

納米團(tuán)簇的修飾：Pt,Au,Ag,Cu

Gold Nanoclusters, BSA coated

Gold Nanoclusters, PEG coated

Gold Nanoclusters, amine functional

Gold Nanoclusters, carboxyl functional

Gold Nanoclusters, lysozyme coated

金納米簇，納米金簇 ，Gold nanoclusters  AuNCs，功能化金納米簇

金屬納米團(tuán)簇的雙親性修飾及其類表面活性劑

硫醇保護(hù)的金屬納米團(tuán)簇（Nanocluster, NC）

鉑納米團(tuán)簇在修飾的石墨HOPG表面

巰基修飾的銀納米團(tuán)簇

AIE功能的納米團(tuán)簇

不同金屬金含量的納米團(tuán)簇

[Au25(SR)18]-納米團(tuán)簇

[Au44(SR)26]2-納米團(tuán)簇

聚集誘導(dǎo)發(fā)光的納米團(tuán)簇

硫醇化銀納米團(tuán)簇

硫醇化的金納米團(tuán)簇

熒光銀納米團(tuán)簇(AgNCs)

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