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          基于葫蘆脲CB[n]超分子多色DNA識(shí)別原理的熒光傳感器介紹
          發(fā)布時(shí)間:2021-03-18     作者:axc   分享到:

          葫蘆脲(CB[n])是一類(lèi)在分子識(shí)別方面具有潛在應(yīng)用價(jià)值的工具分子。近年來(lái),通過(guò)已開(kāi)發(fā)的CB[n]的功能性客體分子以及外部刺激響應(yīng)原理的核酸超分子研究已經(jīng)得到了實(shí)際應(yīng)用,如:G-四鏈體、雙鏈結(jié)構(gòu)操控,核酸雜交的蛋白質(zhì)劑的釋放,可控的DNA延伸,納米孔的DNA損傷的檢測(cè),釋放原理的miRNA的檢測(cè),增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)RNA染色的攝取成像和可調(diào)控的DNA納米孔轉(zhuǎn)移等方面。近來(lái)已發(fā)展的基于CB[n]的超分子傳感器包括三個(gè)原理:指示劑取代分析(IDA,圖B),聯(lián)合結(jié)合分析(ABA,圖C)和直接結(jié)合分析(DBA,圖C)?梢钥闯,無(wú)論是DBA、IDA還是ABA,都需要分析物與CB(n)直接結(jié)合。因此,目前這些方法限制了對(duì)于像DNA這樣大尺寸分析物的應(yīng)用。雖然通過(guò)復(fù)雜合成路徑設(shè)計(jì)的熒光分子實(shí)現(xiàn)了超分子比率DNA解碼,但是,目標(biāo)物濃度依賴(lài)的波長(zhǎng)響應(yīng)的免標(biāo)記多色DNA解碼仍然是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。

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          將黃連堿(COP)和黃藤素(PAL)作為原理驗(yàn)證的指示劑,它們與葫蘆脲[7](CB[7])結(jié)合后有強(qiáng)的熒光。當(dāng)引入含有堿基缺失位點(diǎn)且其對(duì)位堿基為嘧啶的DNA時(shí),能與CB[7]競(jìng)爭(zhēng)COP,使發(fā)光顏色由綠色變?yōu)樽攸S色;而當(dāng)堿基缺失位點(diǎn)的對(duì)位堿基為嘌呤時(shí),就不能與CB7競(jìng)爭(zhēng)COP,此時(shí)溶液顏色仍然保持綠色,表明對(duì)核苷酸顛換多色識(shí)別有一個(gè)較高的選擇性。此外,由于PAL與CB[7]的結(jié)合能力相對(duì)較弱,含有堿基缺失位點(diǎn)的DNA能將PAL從它與CB[7]復(fù)合物中競(jìng)爭(zhēng)出來(lái),因此產(chǎn)生一個(gè)從藍(lán)色到綠色的熒光顏色變化,這種變化與堿基缺失位點(diǎn)對(duì)面核苷酸的類(lèi)型是無(wú)關(guān)的;而不含堿基缺失位點(diǎn)的DNA和錯(cuò)配的DNA不能使顏色發(fā)生改變。表明該方法可作為一種對(duì)堿基缺失位點(diǎn)生物標(biāo)志物檢測(cè)的優(yōu)選方法。

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