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          常用凝集素含:扁豆植物凝集素素/雞乳糖動(dòng)物凝集素/蘑菇凝微生物凝集素
          發(fā)布時(shí)間:2021-03-30     作者:wyf   分享到:

          常用凝集素含:扁豆植物凝集素素/雞乳糖動(dòng)物凝集素/蘑菇凝微生物凝集素

          凝集素是自然界廣泛存在的一大類能凝集細(xì)胞、多糖或糖復(fù)合物的非源于免疫反應(yīng)的糖蛋白,進(jìn)一步被定義為非免疫球蛋白本質(zhì)的蛋白質(zhì)或糖蛋白,它能夠特異性識(shí)別并可逆結(jié)合復(fù)雜糖復(fù)合物中的糖鏈,而不改變所結(jié)合糖基的共價(jià)結(jié)構(gòu)。它們廣泛存在于各種各樣的生物體中,并在生命活動(dòng)如病毒、細(xì)菌、支原體和寄生蟲感染、細(xì)胞和可溶性組分之間的尋靶作用、受精作用、**細(xì)胞轉(zhuǎn)移、生長(zhǎng)、分化中都起著重要作用。  

          凝集素的分類

          按來源分類:可以分為植物凝集素,動(dòng)物凝集素和微生物凝集素三類。例如,扁豆凝集素(Lens culinaris 1ectin,LCL)是植物凝集素素,雞乳糖凝集素素(Chicken lactose lenin,CLL)是動(dòng)物凝集素,而蘑菇凝集素素(Agaricus bisporus lectin,ABL)是真菌類的微生物凝集素。  

          按凝集素在細(xì)胞中存在部位分類:可以分為可溶性凝集素和膜結(jié)合凝集素。例如,唾液酸糖蛋白(Major sialoglcoprotein)是紅細(xì)胞膜上面結(jié)合的凝集素蛋白,這種凝集素需用緩沖溶液,甚至采用去垢劑溶解才能進(jìn)一步純化。伴刀豆凝集素(ConcanavaliaAConA)是**的可溶性凝集素,可溶于09%生理鹽水,可以采用**的蛋白質(zhì)純化方式純化。

          按凝集素的糖結(jié)合專一性分類  

          (1)D-甘露糖,D-葡萄糖結(jié)合,例如蠶豆凝集素(Hciafaba lcclin,VFL)和豌豆凝集素(Pisum sativum lectinPSL)

           (2)2-乙酰氨基2-脫氧-D-葡萄糖結(jié)合,例如馬鈴薯凝集素(Solanum tuberosum lecfinSTL)和麥胚凝集素(Wheat germ agglutinin,WGA)

          (3)2-乙酰氨基2-脫氧-D-半乳糖結(jié)合,例如剌槐凝集素(Robinia pseudoaccacia lecfin,RPL)和蝸牛凝集素(Helixpomatia lectin。HPL)。

          (4) D-半乳糖結(jié)合,例如蓖麻凝集素(Ricinus communis agglutinin,RCA)和花生凝集素(Peanut(Arachis hypogaea)agglutinin,PNA)。  

          (5) (5)L巖藻糖結(jié)合,例如荊豆凝集素(Ulex europeus lectinUEL)和歐洲百脈根凝集素(Lotus tetragonolobus leetin,LTL)

          (6)  (6)唾液酸結(jié)合,例如,龍蝦凝集素(Homarus americanus lectin,HAL)。

          凝集素的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀  目前,人們已分離純化的凝集素逾1000種,它們大多為植物凝集素,其中僅豆科植凝集素即達(dá)600余種。通過分離純化人們可以對(duì)凝集素的理化性質(zhì)、蛋白結(jié)構(gòu)與功能及編碼的基因作進(jìn)一步的研究。目前已純化的凝集素的分子量一般為10-100kDa,如較常見的伴刀豆球蛋白A分子量為104kDa,但小麥胚凝集素分子量?jī)H為36kDa。通常凝集素由亞基組成,一般為2個(gè)或4個(gè),3個(gè)的少見。亞基產(chǎn)生的分子機(jī)制有三種解釋:不同亞基是不同基因編碼的產(chǎn)物;不同亞基由同一基因編碼,翻譯后裂解成分子量相同或不同的肽鏈;翻譯后發(fā)生不同程度的修飾。大多數(shù)凝集素的前體分子都比成熟分子大,翻譯后經(jīng)過裂 解、糖基化或其它加工后成為成熟分子。[3]凝集素不同,化學(xué)組分也是不同的, 有的是簡(jiǎn)單的蛋白質(zhì),有的則為糖蛋白。不同的凝集素分子還具有特定的氨基酸組分。同時(shí),通過研究發(fā)現(xiàn)凝集素的糖結(jié)合位點(diǎn)也是各異的,不同的凝集素分子識(shí)別復(fù)雜碳水化合物上的特定糖殘基,與糖發(fā)生可逆結(jié)合而不改變糖苷鍵的共價(jià)結(jié)構(gòu)。雖然它們的糖結(jié)合活性各不相同,但它們的可結(jié)合的糖基類型大體可分為以下6類:(1) 甘露糖(葡萄糖);(2)N一乙酰氨基葡萄糖;(3) 半乳糖;(4)N一乙酰氨基半乳糖;(5)巖藻糖;(6)唾液酸。

           

          凝集素的應(yīng)用前景  凝集素的特殊的生物學(xué)功能,使其具有廣泛的利用前景。特別是隨著生物工程的研究手段和研究領(lǐng)域的不斷擴(kuò)大,凝集素的各種實(shí)際應(yīng)用也展現(xiàn)了新的途徑。  凝集素在生命機(jī)體中識(shí)別外來物,在體內(nèi)<)起調(diào)理作用。因此它在認(rèn)識(shí)和解決集約化、半集約化的養(yǎng)殖生物的防病治病中有重要作用。對(duì)凝集素認(rèn)識(shí)的普及和研究的深入將提高我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)總體水平。對(duì)凝集素開發(fā)、利用和生化工程技術(shù)的拓展,將會(huì)使養(yǎng)殖業(yè)及其病害防治轉(zhuǎn)化為高技術(shù)類型。  凝集素的防衛(wèi)作用可應(yīng)用于抗蟲基因工程,為抗蟲育種提供新的途徑。雪花蓮?fù)庠茨?/span>(GNA)對(duì)某些咀嚼式和刺吸式昆蟲均有抗性,如煙草夜蛾、豇豆象、飛虱、葉蟬和蚜蟲,但對(duì)高等動(dòng)物沒有毒性。將編碼雪花蓮?fù)庠茨爻墒斓鞍椎?/span>eDNA GNA 12和其前體蛋白eDNA GNA 34插入到二元載體pBin438的雙倍增強(qiáng)子CaM V 35S啟動(dòng)子或二元載體pBcop lCoYMV啟動(dòng)子下游,分別構(gòu)建成植物表達(dá)載體pBGnal2、pBGna34、pBCGnal2pBCGna34。  凝集素由于能和糖專一性識(shí)別,而且糖的專一性范圍又廣,加上易于分離

          純化,所以經(jīng)常作為免疫學(xué)和糖生物學(xué)的分子探針,對(duì)生理、生化過程進(jìn)行研究。先用標(biāo)記物將凝集素標(biāo)記,再利用標(biāo)記的凝集素來研究糖復(fù)合物的結(jié)構(gòu)、在生物體內(nèi)的分布,也可用于研究生理、病理過程。比如研究精子在與卵子結(jié)合過程中,其細(xì)胞表面受體的種類和分布的變化:研究細(xì)胞分化發(fā)育過程中,糖結(jié)構(gòu)發(fā)生的變化和蛋白質(zhì)糖基化;惡性病變細(xì)胞表面糖類結(jié)構(gòu)變化及轉(zhuǎn)移過程中糖類結(jié)構(gòu)特征等等。由于凝集素可與糖分子專一性可逆結(jié)合,從而被廣泛用于分離純化糖分子、糖蛋白、糖脂。利用凝集素分離糖蛋白開始于ConA分離酵母蔗糖酶。現(xiàn)在已有商品化的ConA、扁豆凝集素、PNA等親合層析柱出售。目前,己應(yīng)用GNA純化鼠血清中免疫球蛋白2M的單克隆抗體,用ConA純化絨毛膜促性腺激素(HGG)、人血清白蛋白、胰島素受體等;還有,用PHA分離干擾素和免疫球蛋白等。另外,部分凝集素對(duì)人類及動(dòng)物反轉(zhuǎn)錄病毒(H IV)和巨細(xì)胞病毒具有選擇性**作用。[3]  細(xì)胞在正常分化、發(fā)育或異常病變過程中,其表面糖鏈結(jié)構(gòu)有很大的變化,**變細(xì)胞往往表現(xiàn)出糖鏈的變化。且**變細(xì)胞表面特異凝集索受體發(fā)生變化,凝集素可作為生物探針探測(cè)細(xì)胞表面糖分布及變異細(xì)胞表面糖的變化。扁豆凝集素和豌豆凝集素可鑒別診斷肝**和肝炎患者血清中血清甲胎蛋白(AFP)的升高是源于肝**細(xì)胞或是其它病肝細(xì)胞。國(guó)內(nèi)有人采用此法鑒別肝**和肝炎,使肝**假陽(yáng)性率明顯下降。ConA可用于胎兒神經(jīng)管缺陷及另一些畸形,如脊柱裂的產(chǎn)前診斷,這是~個(gè)很有價(jià)值的輔助診斷方法,幾乎所有這類畸形的妊娠婦女,羊水中糖蛋白濃度**降低,不與ConA發(fā)生作用或僅有輕微作用。溶酶體蓄積性疾病以某些特殊的水解酶缺乏為特征,如巖藻糖苷蓄積癥病人,缺乏aL一巖藻糖苷酶,其神經(jīng)元及其它某些類型的細(xì)胞可與荊豆凝集素強(qiáng)烈作用,以輔助診斷。  T淋巴細(xì)胞在體外經(jīng)凝集素激活后,可轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,根據(jù)淋巴母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化情況,可反應(yīng)機(jī)體的細(xì)胞免疫水平,監(jiān)視各種免疫**和免疫增強(qiáng)的療效。用淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)艾滋病人的免疫功效,亦是一個(gè)簡(jiǎn)單**的方法。PHAConA等植物凝集素用作皮內(nèi)注射可反應(yīng)**、肝炎等患者的細(xì)胞免疫能力。我國(guó)目前普遍采用PHA作促細(xì)胞分裂原評(píng)價(jià)各種疾病患者的免疫功能。SBA可選擇性沉淀在骨髓移植中引起排斥反應(yīng)的T淋巴細(xì)胞,收集SBA處理過的骨髓成功地用于臨床骨髓移植。PHA配合化療、放療或其它**能夠提高單一療法的療效。對(duì)頑固性白血病、晚期惡性滋養(yǎng)葉**應(yīng)用PHA合并療法取得了明顯療效。甘潤(rùn)良等用I標(biāo)記的花生凝集素對(duì)裸鼠載人胃**進(jìn)行靶向**,療效**,****率達(dá)732%,可延緩**生長(zhǎng),延長(zhǎng)了荷瘤宿主的生存期。并且對(duì)小鼠沒有毒性作用。  凝集素也可在固氮工程中發(fā)揮作用。較近的研究發(fā)現(xiàn)識(shí)別根瘤菌的因子是豆科植物根上的凝集素。目前,固氮工程嘗試將豆科植物的凝集素基因轉(zhuǎn)化到非豆科植物,再接種豆科植物的根瘤菌,使該種非豆科植物被侵染和結(jié)瘤。固氮菌能在豌豆上形成根瘤,但不能在白三葉草根和發(fā)根中形成根瘤。若將PSL基因轉(zhuǎn)入自三葉草后,白三葉草根毛上也產(chǎn)生了根瘤。PSL定位于轉(zhuǎn)基因白三葉草根表皮細(xì)胞的外表面和根毛間段,但正常的三葉草和發(fā)根中則沒有PSL。這種固氮方法應(yīng)用于糧食作物將有很大的意義。  總之,凝集素較初在植物中被檢測(cè)到并命名為盤凝索,一直到目前成為具有許多重要功能和用途的普遍存在的識(shí)別分子,在這120多年來,人們對(duì)凝集素的認(rèn)識(shí)已經(jīng)有了很大的提高。凝集素作為生物體內(nèi)一類特殊的蛋白質(zhì)(糖蛋白),在防御病原體入侵、存貯營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、;R(shí)別等方面有其獨(dú)特的功能。我們可以利用這些特性,在生物工程、臨床研究等各方面發(fā)揮作用,利用凝集素的功能造福人類。

          產(chǎn)品供應(yīng):

          小扁豆凝集素-瓊脂糖凝膠

          Acitavated CH Sepharose 4B

          Acitavated CH-瓊脂糖凝4B

          Calmodulin Sepharose4B

          鈣調(diào)素-瓊脂糖凝4B

          Lentil lectin Sepharose4B

          小扁豆凝集素-瓊脂糖凝4B

          雙花扁豆凝集素(DBA)

          黑皮扁豆凝集素

          FITC-LCA 綠色熒光標(biāo)記小扁豆凝集素

          熒光探針標(biāo)記的扁豆凝集素

          扁豆凝集素凝膠

          辣根過氧化物酶標(biāo)記的刀豆凝集素(HRP-ConA)

          辣根過氧化物酶歐曼陀羅凝集素((HRP-DSA)

          辣根過氧化物酶麥胚凝集素(HRP-WGA)

          辣根過氧化物酶小扁豆凝集素(HRP-LCA)

          血清α1抗胰蛋白酶小扁豆凝集素

          刀豆凝集素單克隆抗體

          菜豆凝集素(PHA)單克隆抗體

          美洲商陸(PWM)單克隆抗體

          花生凝集素(PNA)單克隆抗體

          扁豆凝集素(LcA)單克隆抗體

          流腦多糖協(xié)同扁豆凝集素

          扁豆凝集素十六烷基季銨鹽包裹磁性納米顆粒

          小扁豆凝集素(LCA)的瓊脂糖微量離心柱分離AFP-L3

          改性凝集素包裹的磁性大分子脂質(zhì)體納米微球

          紅藻凝集素GRFT

          藍(lán)藻凝集素CVN

          香蕉凝集素H84

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          wyf 03.30

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