125I放射同位素標記單克隆抗體技術說明

125I標記單克隆抗體技術

同位素標記是一種重要的抗體標記技術，牨977年Yalow等在放射免疫測定法所作突出貢獻而獲得醫(yī)學和生理學 諾貝爾獎。McAb標記同位素后除應用于放射免疫測定外，還可用于競爭結合試驗、體內(nèi)**定位等。

(一)　原理

氯胺桾即對甲苯碘氯胺鈉，在水溶液中生成次氯酸，為一種溫和氧化劑，當加入到有蛋白質(zhì)和碘的弱堿水溶液中，可將I2氧化為I+并結合到氨基酸上。如標記條件溫和，標記后的McAb仍具有良好的結合活性，通過放射性同位素強度的測定可反映相應抗原 的含量。

(二)　方法

　　　　　　在細胞凍存管內(nèi)加入純化的McAb100μg／100μl，

　　　　　　再加入10μl 0.05M磷酸緩沖液

　　　　　　再加入10μl(含1mCi)125I

　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入10μl氯胺-T(5mg／ml溶于0.05M

　　　　　　磷酸鹽緩沖液)，孵育時間不超過30秒

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入100μl偏重亞硫酸鈉(1.2mg／ml溶于

　　　　　　0.05M磷酸緩沖液 )

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　加入200μl　KI溶液(少許結晶KI溶于0.05M

　　　　　　磷酸緩沖液＋4％牛血清白蛋白)

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　用PD10柱(Sephadex G25)除去游離125I

　　　　　　用4％BSA　PBS洗脫

　　　　　　　　　　　　　↓

　　　　　　分部收集，0.5ml／管

　　每管取5μl進行γ計數(shù)，計算標記抗體的比活性和標記率

　　　　　　　　　　　結合于McAb１２５I放射性強度(cpm)

　　　　標記率(％)＝───────────────────

　　　　　　　　　　　　　　總放射性強度(cpm)

　　　　　　　　　　　　　　　　結合于某一管McAb上的放射性強度

　　　　比活性(μCi／μgMcAb)＝────────────────

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　某一管McAb總量

(三)　試劑器材

1.　純化后的McAb

2.　0.05M磷酸緩沖液，氯胺桾，偏重亞硫酸鈉，KI，BSA

3.　125I

4.　有通風裝置的超凈臺，γ計數(shù)儀

5.　PD10柱(Sephadex G25)

(四)　注意事項

1.　嚴防同位素污染，工作人員必須穿著工作衣，戴口罩、帽子、手套。必須在嚴密的通風櫥或通風超凈臺中操作。操作前后對實驗室環(huán)境進行監(jiān)測。所用125I和標記物應妥善保管。

2.　如標記細胞因子、激素等，應選用更溫和的標記方法，使保持更好的生物學活性。

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125l同位素    

125l放射同位素標記標記小分子化合物    

125l放射同位素標記標記抗體    

125l放射同位素標記納米粒子    

125l放射同位素標記大分子化合物    

125l放射同位素標記標記生物蛋白    

125l放射同位素標記多肽    

125l放射同位素標記前體化合物    

氟-18放射同位素標記生物活性分子    

125l放射同位素標記醫(yī)藥    

125l放射同位素標記常規(guī)活性基團    

125l放射同位素標記特殊活性基團    

125l放射同位素標記熒光素    

125l放射同位素標記磷脂    

125l放射同位素標記高分子聚合物    

125l放射同位素標記共聚物    

125l放射同位素標記牛血清白蛋白    

125l放射同位素標記人血清白蛋白    

125l放射同位素標記轉(zhuǎn)鐵蛋白    

125l放射同位素標記小麥胚凝集素    

125l放射同位素標記鏈霉親和素    

125l放射同位素標記肝素    

125l放射同位素標記刀豆球蛋白    

125l放射同位素標記過氧化氫酶    

125l放射同位素標記胰島素    

125l放射同位素標記絡蛋白    

125l放射同位素標記卵清蛋白    

125l放射同位素標記凝集素    

125l放射同位素標記葡聚糖    

125l放射同位素標記半乳糖化殼聚糖化合物    

125l放射同位素標記右旋糖酐    

125l放射同位素標記溶菌酶    

125l放射同位素標記海藻酸鈉    

125l放射同位素標記殼聚糖    

125l放射同位素標記半乳糖    

125l放射同位素標記甘露糖    

125l放射同位素標記葡萄糖    

125l放射同位素標記乳糖基    

125l放射同位素標記黃原膠    

125l放射同位素標記巖藻多糖    

125l放射同位素標記木聚糖    

125l放射同位素標記纖維二糖    

125l放射同位素標記香菇多糖    

125l放射同位素標記硫酸軟骨素    

125l放射同位素標記辣根過氧化氫酶    

125l放射同位素標記**或小分子    

125l放射同位素標記甲氨蝶呤    

125l放射同位素標記紫杉醇    

125l放射同位素標記阿霉素    

125l放射同位素標記順鉑    

125l放射同位素標記環(huán)丙沙星    

125l放射同位素標記甲硝唑    

125l放射同位素標記雷替曲塞    

125l放射同位素標記培美曲塞    

125l放射同位素標記磺胺地索辛    

125l放射同位素標記茴香酰胺    

125l放射同位素標記雌性激素    

125l放射同位素標記金剛烷    

125l放射同位素標記阿奇霉素    

125l放射同位素標記氮川三乙酸-鎳    

125l放射同位素標記多肽RGD    

125l放射同位素標記cRGD    

125l放射同位素標記Angiopep    

125l放射同位素標記TAT    

125l放射同位素標記Octreotide    

125l放射同位素標記SP94    

125l放射同位素標記CPP    

125l放射同位素標記CTT2    

125l放射同位素標記CCK8    

125l放射同位素標記GEII    

125l放射同位素標記RVG29    

125l放射同位素標記YIGSR    

125l放射同位素標記WSW ( WSWGPYSC)    

125l放射同位素標記Pep-1 (CGEMGWVRC)    

125l放射同位素標記RVG29MMPs(GGGGCTTHWGFTLC)    

125l放射同位素標記NGR    

125l放射同位素標記R8    

125l放射同位素標記氨基酸    

125l放射同位素標記聚氨基酸    

125l放射同位素標記聚賴氨酸    

125l放射同位素標記聚鳥氨酸    

125l放射同位素標記聚精氨酸    

125l放射同位素標記聚肌氨酸    

125l放射同位素標記聚天冬氨酸    

125l放射同位素標記聚谷氨酸    

125l放射同位素標記組氨酸    

125l放射同位素標記谷氨酸    

125l放射同位素標記賴氨酸    

125l放射同位素標記蘇氨酸    

125l放射同位素標記亮氨酸    

125l放射同位素標記纈氨酸    

125l放射同位素標記色氨酸    

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125l放射同位素標記鳥氨酸    

125l放射同位素標記天冬氨酸    

125l放射同位素標記絡氨酸    

125l放射同位素標記甘氨酸    

125l放射同位素標記絲氨酸    

上述產(chǎn)品定制僅用于科研，不可用于人體實驗!

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