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          FITC-PEG-BIOTIN,熒光素-聚乙二醇-生物素,F(xiàn)ITC-PEGylated Biotin如何使用?
          發(fā)布時(shí)間:2025-05-22     作者:zhn   分享到:

          一、基本信息

          FITC-PEG-BIOTIN(熒光素-聚乙二醇-生物素)

          FITC-PEG-BIOTIN 是一種三功能連接分子,由熒光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分組成。FITC 具備綠色熒光示蹤功能(Ex/Em495/519 nm),PEG 提供分子柔性和親水性,可增強(qiáng)溶解性與穩(wěn)定性,而生物素能特異性結(jié)合親和素或鏈霉親和素。此構(gòu)造常用于構(gòu)建熒光標(biāo)記的靶向系統(tǒng)、生物成像、納米載體修飾和親和捕獲等研究。適合在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、診斷檢測(cè)或蛋白探針標(biāo)記中使用,兼具識(shí)別與成像雙重功能。

          中文名稱:熒光素標(biāo)記聚乙二醇-生物素

          英文名稱:FITC-PEG-Biotin

          別名:熒光生物素-PEG、FITC-PEG?-BiotinFITC-PEGylated Biotin

          CAS號(hào):無(wú)固定CAS(為定制連接分子)

          結(jié)構(gòu)類型:FITCPEGBiotin(三元功能分子)

          FITC-PEG-BIOTIN 

          二、分子構(gòu)成與說(shuō)明

          FITC-PEG-Biotin 是一種三功能修飾分子,由以下三部分組成:

          1. FITCFluorescein Isothiocyanate

             提供綠色熒光信號(hào),便于可視化標(biāo)記或熒光成像;

             通常通過(guò)異硫氰酸酯與氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定硫脲鍵。

          2. PEG(聚乙二醇)

             提高分子親水性和柔韌性;

             分子量常用規(guī)格為:PEG? = 500、10002000、3400、5000;

             通過(guò)線性或單端官能化PEG提供空間間隔作用,減少非特異性結(jié)合。

          3. Biotin(生物素)

             可與鏈霉親和素/親和素高親和結(jié)合(Kd 10??? M);

             用于靶向捕獲、固定化、免疫分析等生物識(shí)別場(chǎng)景。

           

          三、物化屬性

          項(xiàng)目

          參數(shù)


          分子量

          800–6000 Da(取決于 PEG 分子量)


          外觀

          淡黃色至橙黃色固體或粘稠液體(低MW為固體,高MW為粘稠液)


          溶解性

          良好溶于水、PBSDMSO、DMF、乙醇等;不溶于醚類或烴類溶劑


          熒光激發(fā)波長(zhǎng)

          λ_ex ≈ 490–495 nm


          熒光發(fā)射波長(zhǎng)

          λ_em ≈ 518–520 nm(綠色熒光)


          穩(wěn)定性

          干燥避光條件下穩(wěn)定,溶液中較易光解


          儲(chǔ)存條件

          干燥粉末建議 -20°C 密閉避光儲(chǔ)存;水溶液推薦分裝于避光小管中冷凍保存

          pH 穩(wěn)定范圍

          *佳使用范圍為 pH 6.5–8.0


                           |

           

          四、制備方法簡(jiǎn)介

          FITC-PEG-Biotin 典型合成路線如下:

          1. 合成 PEG-Biotin:通過(guò) NHS-Biotin 與氨基修飾 PEG 發(fā)生酰胺鍵反應(yīng);

          2. 連接 FITC:使用 FITC PEG-Biotin 末端氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定的 FITC-PEG-Biotin;

          3. 純化:使用透析、凝膠過(guò)濾或 HPLC 純化;

          4. 干燥:低溫凍干以便于儲(chǔ)存與運(yùn)輸。

           

          五、主要應(yīng)用領(lǐng)域

          1. 熒光示蹤與成像

          可用于細(xì)胞、組織、納米粒子的可視化;

          綠色熒光適配多種共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀檢測(cè)系統(tǒng)。

          2. 親和素-生物素系統(tǒng)中的熒光標(biāo)記探針

          與親和素/鏈霉親和素偶聯(lián)物結(jié)合實(shí)現(xiàn)高親和熒光成像或固定化;

          常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕獲、熒光免疫分析等。

          3. 納米材料功能化修飾

          修飾脂質(zhì)體、納米粒、磁珠、納米膠束、水凝膠等;

          提供熒光與靶向雙重功能。

          4. PEG藥物載體或蛋白偶聯(lián)劑的構(gòu)建

          構(gòu)建熒光示蹤的 PEGylated 載藥系統(tǒng);

          也可用于蛋白偶聯(lián)物追蹤研究其體內(nèi)外行為。

           

          六、常見規(guī)格與形式

          名稱

          PEG分子量

          形式




          FITC-PEG500-Biotin

          500 Da

          固體

          -20°C 避光儲(chǔ)存



          FITC-PEG2000-Biotin

          2 kDa

          固體或粘稠液

          -20°C 避光儲(chǔ)存

          FITC-PEG5000-Biotin

          5 kDa

          粘稠液體

          -20°C 避光儲(chǔ)存



           

          七、使用方法建議

          建議使用前用 DMSO PBS 溶解至所需濃度;

          避光操作,避免強(qiáng)光照射導(dǎo)致熒光團(tuán)降解;

          建議現(xiàn)配現(xiàn)用,長(zhǎng)期存放可按 0.11 mg/mL 分裝凍存;

          配體修飾時(shí),可與胺基表面、蛋白質(zhì)或材料通過(guò)親和素連接。

           

          八、中文文獻(xiàn)應(yīng)用實(shí)例

          1. 《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》,2021

             使用 FITC-PEG-Biotin 修飾多肽探針,通過(guò)鏈霉親和素固定于微陣列芯片,用于微量生物標(biāo)志物熒光檢測(cè)。

          2. 《分析化學(xué)》,2020

             利用 FITC-PEG-Biotin 標(biāo)記磁珠,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面糖鏈識(shí)別和富集成像,驗(yàn)證其靈敏性與特異性。

          3. 《藥學(xué)學(xué)報(bào)》,2022

             在腫瘤靶向納米載藥系統(tǒng)構(gòu)建中,使用 FITC-PEG-Biotin 實(shí)現(xiàn)納米顆粒的雙功能修飾:生物素結(jié)合靶向、FITC熒光示蹤體內(nèi)分布。

           

          九、優(yōu)點(diǎn)總結(jié)

          ? 同時(shí)具備 親和素結(jié)合能力 + 熒光可視化 + PEG鏈延展性;

          ? 可在不影響靶點(diǎn)結(jié)合的情況下提升水溶性;

          ? 操作簡(jiǎn)單、標(biāo)記穩(wěn)定,適合生物傳感、材料修飾和體內(nèi)示蹤。

           以上資料由小編zhn提供,僅用于科研


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