CY5.5-Dextran,Dextran-CY5.5,CY5.5標(biāo)記葡聚糖用于精準(zhǔn)診療中的實(shí)時成像應(yīng)用探索
CY5.5-Dextran 是一種將近紅外熒光染料 CY5.5 共價標(biāo)記于葡聚糖分子上的功能性熒光探針。葡聚糖提供良好的生物相容性、可調(diào)分子量及分子滲透性,而 CY5.5 賦予其強(qiáng)熒光、深組織穿透能力和較低的背景干擾,是組織示蹤、活體血管成像、屏障完整性檢測和腫瘤滲透研究的理想工具。
一、基本信息
中文名:CY5.5-葡聚糖 / CY5.5 熒光標(biāo)記葡聚糖
英文名:CY5.5-Dextran
別稱:遠(yuǎn)紅外葡聚糖、Cyanine 5.5 熒光葡聚糖、紅外染料標(biāo)記葡聚糖
基本結(jié)構(gòu):以天然多糖葡聚糖(Dextran)為骨架,通過共價鍵偶聯(lián)熒光染料 Cyanine 5.5(簡稱 CY5.5)
結(jié)構(gòu)式:
二、光學(xué)性質(zhì)
激發(fā)波長(λ_ex):675–690 nm
發(fā)射波長(λ_em):694–710 nm
熒光顏色:遠(yuǎn)紅外(近紅外邊緣)
組織穿透力:較高,適合用于小動物活體成像
信噪比:高,組織背景自發(fā)熒光干擾少
熒光強(qiáng)度與穩(wěn)定性:優(yōu)良,適用于實(shí)時長時間成像
相較于可見光熒光探針(如 FITC、CY3),CY5.5-Dextran 可用于深部組織的非侵入式成像和動態(tài)滲透性分析,較大提升活體實(shí)驗(yàn)的成像質(zhì)量和分析精度。
三、物化屬性
分子量(Dextran 部分):常見為 10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等多種規(guī)格
外觀:暗藍(lán)紫色或近黑色粉末
溶解性:高度水溶性,易溶于水、PBS、HEPES、Tris 等緩沖液
連接方式:CY5.5-NHS 酯或 CY5.5-Maleimide 與氨基化葡聚糖反應(yīng)生成穩(wěn)定酰胺或硫醚鍵
穩(wěn)定性:干燥避光狀態(tài)下可保存 1–2 年;水溶液建議低溫避光短期使用
四、合成方法簡述
葡聚糖氨基化:利用氯乙酸、EDA(乙二胺)或其他交聯(lián)劑在葡聚糖分子上引入 -NH? 基團(tuán);
標(biāo)記反應(yīng):加入 CY5.5-NHS 酯(或 CY5.5-Mal),在 pH 8.0–8.5 條件下反應(yīng) 4–12 小時;
純化:透析(如 3.5–10 kDa MWCO 膜)或凝膠柱層析去除游離染料;
凍干保存:避光保存,制得 CY5.5-Dextran 成品。
五、主要應(yīng)用領(lǐng)域
活體熒光成像(In Vivo Fluorescence Imaging)
可通過尾靜脈注射進(jìn)入血液系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)血管成像、腫瘤定位、藥物輸運(yùn)路徑分析。
腫瘤血管滲透性評估(EPR 效應(yīng))
利用 CY5.5-Dextran 在腫瘤組織中的滯留能力評估藥物載體分布和靶向效率。
生理屏障研究
用于研究腸道、肺泡、腦血管屏障(BBB)的通透性變化,如炎癥、缺血、藥物作用等引起的滲漏。
組織微循環(huán)與淋巴示蹤
通過不同分子量 CY5.5-Dextran 標(biāo)記,研究微血管滲漏、淋巴結(jié)示蹤和組織交換動態(tài)。
水凝膠/微載體擴(kuò)散與釋放研究
用作大分子模型探針評估材料孔徑與釋放特性。
六、優(yōu)勢特點(diǎn)
? 近紅外邊緣發(fā)射,信號穿透強(qiáng)、背景低
? 葡聚糖骨架生物相容性高,無毒無免疫性
? 多種分子量可調(diào),適應(yīng)不同應(yīng)用需求
? 可用于多模態(tài)熒光成像系統(tǒng)(IVIS、LI-COR)
? 可定制化標(biāo)記度,滿足科研或臨床前研究要求
七、代表性文獻(xiàn)與研究實(shí)例
Li, Y. et al. Non-invasive imaging of tumor permeability using NIR-labeled dextran probes. Theranostics, 2021, 11(2): 842–857.
→ 使用 CY5.5-Dextran 分析乳腺腫瘤模型的血管滲漏情況。
Wang, Z. et al. Visualization of gut barrier integrity using fluorescent dextran probes. Journal of Biomedical Optics, 2020, 25(9): 095002.
→ 采用 CY5.5-Dextran 研究 DSS 誘導(dǎo)腸炎小鼠模型中腸上皮屏障滲漏。
Zhou, Q. et al. CY5.5-dextran for mapping lymphatic drainage in metastatic tumor models. ACS Biomater. Sci. Eng., 2022, 8(3): 1402–1412.
→ CY5.5-Dextran 用于腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移通道可視化示蹤。
Chen, X. et al. Assessing pulmonary vascular leak using CY5.5-dextran in LPS-challenged mice. Scientific Reports, 2020, 10, 3239.
→ 使用 CY5.5 熒光葡聚糖檢測肺炎模型中肺泡毛細(xì)血管滲漏。
八、使用與保存建議
使用濃度:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求一般為 0.1–5 mg/mL,體內(nèi)注射濃度約為 1 mg/mL;
溶液保存:4°C 暗處短期保存(< 7 天),長期使用建議每次現(xiàn)配;
干粉保存:–20°C 避光可保存 12–24 個月;
注意事項(xiàng):避免金屬離子、強(qiáng)氧化劑及高溫光照對染料造成破壞。
總結(jié)
CY5.5-Dextran 是一種適用于近紅外熒光成像的葡聚糖類探針,結(jié)合了葡聚糖的優(yōu)良生物相容性和 CY5.5 染料的遠(yuǎn)紅外成像優(yōu)勢,在血管滲漏、組織屏障完整性評估、腫瘤靶向輸運(yùn)和材料擴(kuò)散性能研究中發(fā)揮了重要作用。其低背景、高信噪比的特點(diǎn)使其在活體成像實(shí)驗(yàn)中尤為突出。
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