CY7.5-Fucoidan,CY7.5標(biāo)記巖藻多糖,CY7.5偶聯(lián)褐藻糖膠巖藻多糖的制備方法
CY7.5-Fucoidan 是將近紅外熒光染料 Cyanine7.5(CY7.5)通過(guò)共價(jià)化學(xué)反應(yīng)整合到褐藻多糖(Fucoidan)上的高性能生物探針,適合體外深層成像與體內(nèi)標(biāo)記。Fucoidan 主鏈由 L-巖藻糖殘基構(gòu)成,部分殘基帶有硫酸酯基,結(jié)構(gòu)分支度與硫酸化程度可通過(guò)離子交換層析或乙醇分級(jí)沉淀進(jìn)行分級(jí)純化。
CY7.5 分子含有長(zhǎng)共軛多烯系統(tǒng)以及氮—碳雜環(huán),激發(fā)波長(zhǎng)≈780 nm,發(fā)射≈800–820 nm,在組織自發(fā)熒光干擾低的窗口工作。常用的活化形式為 CY7.5-NHS 酯或 CY7.5-maleimide。制備時(shí),首先將 Fucoidan 在含少量 EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺)/NHS 中活化其羧基,生成 Fucoidan-NHS 中間體;或預(yù)先在多糖上接入短鏈雙胺(如乙二胺),引入可與 CY7.5-NHS 反應(yīng)的胺基。
偶聯(lián)反應(yīng)配置:
前處理:Fucoidan(10 mg/mL)溶于 PBS(pH 6.5–7.0),與 EDC/NHS(摩爾比 1:1.2:1.2)孵育 30 min,生成活性酯。
偶聯(lián)反應(yīng):緩慢加入 CY7.5-NHS(染料與多糖羧基摩爾比約 0.05–0.1),在保護(hù)避光條件下輕柔搖床反應(yīng) 4–8 小時(shí)。
終止與純化:以乙醇沉淀或超濾離心(MWCO 10 kDa)移除未反應(yīng)染料與小分子副產(chǎn)物;透析(MWCO 3.5 kDa)過(guò)夜后凍干得白色至淺紫色粉末。
終產(chǎn)物偶聯(lián)度可通過(guò)紫外–可見吸收譜(CY7.5 吸光度 vs. Fucoidan 吸光度比值)和熒光定量分析計(jì)算。典型偶聯(lián)度為每 100 kDa 多糖帶 2–5 個(gè) CY7.5 分子,以確保信號(hào)強(qiáng)度與生物活性兼顧。該探針在生理鹽濃度與 37 °C 條件下穩(wěn)定,可應(yīng)用于深組織熒光成像、淋巴引流示蹤及腫瘤標(biāo)記研究。
產(chǎn)品名稱:CY7.5-Fucoidan,CY7.5標(biāo)記巖藻多糖
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.05.23