FITC-Gluconic acid，熒光素標(biāo)記葡萄糖酸的反應(yīng)步驟

FITC-Gluconic acid 的合成主要依賴(lài)于 FITC（Fluorescein isothiocyanate）與葡萄糖酸胺基衍生物之間的親核取代反應(yīng)，生成穩(wěn)定的熒光硫脲鍵結(jié)構(gòu)。以下是合成流程的主要步驟：

步：葡萄糖酸胺基化修飾

由于葡萄糖酸本身不含胺基，需通過(guò)引入氨基基團(tuán)實(shí)現(xiàn)染料偶聯(lián)。常用方法為：

將葡萄糖酸溶于 MES 緩沖液；

使用 EDC/NHS 激活羧基；

添加乙二胺反應(yīng)生成 Gluconic acid–NH?；

用 NaBH? 還原 Schiff 堿，形成穩(wěn)定胺基。

第二步：FITC 活性處理

FITC 為異硫氰酸酯類(lèi)染料，無(wú)需額外激活，可直接使用。需預(yù)先溶于無(wú)水 DMSO 或 DMF 中，并避光保存。

第三步：偶聯(lián)反應(yīng)

將 Gluconic acid–NH? 溶解于 0.1 M 碳酸氫鈉緩沖液（pH 8.5）中，緩慢加入 FITC 溶液，避光攪拌反應(yīng) 12–18 小時(shí)。反應(yīng)溫度建議維持在 4–25 °C 范圍，避免染料降解。

第四步：純化處理

反應(yīng)結(jié)束后采用以下方法去除未反應(yīng)染料與副產(chǎn)物：

透析法（MWCO 1–3 kDa，緩沖液換液3次以上）；

或 Sephadex G-25 柱層析法。

第五步：結(jié)構(gòu)表征

使用 UV-Vis 光譜確認(rèn) λmax ≈ 495 nm；

熒光光譜驗(yàn)證發(fā)射峰 λem ≈ 520 nm；

可結(jié)合 HPLC 與質(zhì)譜分析確認(rèn)偶聯(lián)率及純度。

合成完成的 FITC-Gluconic acid 為黃色至黃綠色粉末或溶液，水溶性好、熒光強(qiáng)，可冷凍干燥儲(chǔ)存于避光條件下（–20 °C）。該探針適用于糖類(lèi)受體研究、葡萄糖代謝成像、靶向藥物釋放系統(tǒng)以及多糖衍生物功能化。

產(chǎn)品名稱(chēng)：FITC-Gluconic acid，熒光素標(biāo)記葡萄糖酸

純度：95%+

性狀：基于不同的分子量，呈白色 / 類(lèi)白色固體，或液體。

溶劑：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。

儲(chǔ)藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.05.23