文獻(xiàn)：VHH-Mediated targeting of osteoarthritic Synovium by synthesizing functional lipid nanoparticles using post-insertion

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本文主要研究功能性LNPs的合成。測(cè)試了脂質(zhì)插入后的方法，因此，脂質(zhì)首先與功能性生物配體結(jié)合。結(jié)合后，將功能性脂質(zhì)插入LNP中，為此，測(cè)試了三種脂質(zhì)摩爾比：0.1、0.2和0.3%。本報(bào)告中的生物配體首先是一種熒光Cy3染料，用于確認(rèn)結(jié)合，后來(lái)是一種靶向細(xì)胞上IL-1R受體的VHH。對(duì)兩個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)DBCO和馬來(lái)酰亞胺以及兩個(gè)PEG間隔長(zhǎng)度2000和5000 Da進(jìn)行了脂質(zhì)測(cè)試。

在人字形結(jié)構(gòu)的微流控芯片的幫助下，以mCherry和tRNA為藥物成功合成了LNPs。通過(guò)熒光測(cè)量分析脂質(zhì)（DSPE-PEG-Mal/DBCO）與Cy3-PEG-SH/疊氮-PEG2000-Cy3染料的結(jié)合，并確認(rèn)反應(yīng)基團(tuán)和PEG間隔物。

與2000Da的PEG間隔物相比，5000Da PEG間隔物實(shí)現(xiàn)了更高的共軛。通過(guò)SDS-page定量證實(shí)了DSPE-PEG-Mal與VHH與5000Da PEG間隔物的結(jié)合。插入DSPE-PEG-Mal-Cy3和DSPEPEG Mal VHH后顯示出不確定的結(jié)果。

通過(guò)熒光測(cè)量分析，兩種PEG間隔物的DSPE-PEG-DBCO-Cy3插入后均成功。DSPE-PEG-DBCO-Cy3的摩爾比越高，熒光信號(hào)越高，因此更多的脂質(zhì)被插入到LNPs中。

含有5000 Da PEG的DSPE-PEG-DBCO-Cy3具有比2000 Da PEG更高的熒光，因此更多的脂質(zhì)被插入到LNPs中。所有插入后的LNP都使用DLS進(jìn)行尺寸和PDI測(cè)量。插入后導(dǎo)致LNP的尺寸和PDI更高，更高的摩爾比不影響尺寸和PDL。

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