CY7-SA（鏈霉親和素）偶聯(lián)物制備方法

中文名稱：CY7標(biāo)記鏈霉親和素
英文名稱：Cy7-Streptavidin Conjugate
別名：Cy7-SA偶聯(lián)物、近紅外染料標(biāo)記鏈霉親和素、賽妥染料標(biāo)記鏈霉親和素

供應(yīng)商：西安pg電子官方生物科技有限公司

用途：科研

一、原料與基本原理：

鏈霉親和素（Streptavidin, SA）：一種四聚體蛋白，具有很強(qiáng)的與生物素結(jié)合能力，是常用的生物素化檢測系統(tǒng)核心分子；

Cy7-NHS（活性酯型近紅外熒光染料）：N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）酯形式的Cy7能高效與蛋白質(zhì)中的賴氨酸殘基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵；

緩沖液：如PBS（pH 7.4）或0.1M碳酸鹽緩沖液（pH 8.3）可提供穩(wěn)定環(huán)境。

二、合成步驟：

1. 材料準(zhǔn)備

   將SA蛋白溶于PBS緩沖液中，濃度一般控制在1–2 mg/mL；

Cy7-NHS染料通常以DMSO為溶劑溶解，濃度約為1–10 mM備用。

2. 共軛反應(yīng)

   按摩爾比約1:5~1:10（SA : Cy7-NHS）緩慢將染料溶液滴加至蛋白溶液中；

反應(yīng)體系在避光條件下，于室溫孵育0.5–2小時，輕輕攪拌促進(jìn)反應(yīng)；

為防止非特異性反應(yīng)，pH維持在7.5–8.5，避免高溫或極端pH。

3. 純化處理

   反應(yīng)結(jié)束后，使用透析袋（10 kDa）透析去除未結(jié)合染料；

或使用凝膠過濾層析（如Sephadex G-25）進(jìn)行純化，收集熒光峰對應(yīng)的蛋白組分。

4. 質(zhì)量控制與儲存

   測定蛋白濃度（280 nm）和熒光吸收峰（Cy7：約750 nm）確認(rèn)偶聯(lián)效率；

最終產(chǎn)物避光分裝于pH 7.4 PBS中，-20°C避光保存。

三、應(yīng)用與優(yōu)勢：

• 應(yīng)用：常用于近紅外熒光成像、生物素標(biāo)記分子檢測、免疫組化、電泳顯色、蛋白質(zhì)追蹤和體內(nèi)熒光成像等；

• 優(yōu)勢：

  發(fā)射波長約775 nm，組織穿透力強(qiáng)；

  與生物素高親和結(jié)合，特異性強(qiáng)；

  可與熒光素、Cy3等染料搭配用于多重檢測。

關(guān)于我們：

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以上資料由小編zhn提供，僅用于科研

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