AF647標(biāo)記兒茶素,AF647-EGCG的反應(yīng)條件,熒光染料標(biāo)記藥物
AF647-EGCG是通過Alexa Fluor 647熒光染料與表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)分子共價(jià)結(jié)合的標(biāo)記化合物。EGCG分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,含有多酚羥基和酯鍵,反應(yīng)條件需精心設(shè)計(jì)以保證偶聯(lián)效率與分子穩(wěn)定。
常用的反應(yīng)條件包括在pH 7.4至8.5的緩沖液中進(jìn)行,以保證AF647-NHS酯的活性和EGCG羥基的親核性。反應(yīng)溫度通常控制在室溫至30℃之間,避免多酚羥基的氧化和結(jié)構(gòu)降解。
溶劑選擇方面,反應(yīng)多在含有適量有機(jī)溶劑(如DMSO或乙醇)與水混合體系中完成,以保證EGCG溶解性和反應(yīng)均一性。反應(yīng)時(shí)間一般為數(shù)小時(shí)至過夜,視具體條件調(diào)整。
為提高偶聯(lián)效率,常常采用適量的堿性緩沖液(如PBS pH 8.0)并避光進(jìn)行,防止染料光降解。反應(yīng)結(jié)束后,利用透析或?qū)游鋈コ捶磻?yīng)物,確保產(chǎn)物純度。
該標(biāo)記物具備優(yōu)異的熒光性能和EGCG的生物活性,適用于分子機(jī)制研究和功能探針開發(fā)。
AF647-EGCG(AF647標(biāo)記兒茶素)制備方法
EGCG(表沒食子兒茶素沒食子酸酯)結(jié)構(gòu)中富含酚羥基,但需引入胺基官能團(tuán)進(jìn)行AF647偶聯(lián)。常用方法是將EGCG與氨丙胺通過苯醌氧化偶聯(lián),引入胺基得到EGCG-NH?。隨后將該產(chǎn)物溶于碳酸鹽緩沖液(pH 8.5)中,與AF647-NHS共反應(yīng)1.5~2小時(shí)。反應(yīng)全程需避光并控制溫度以防止EGCG自氧化。產(chǎn)物經(jīng)層析或HPLC純化,并用質(zhì)譜和吸收光譜進(jìn)行確認(rèn)。得到的AF647-EGCG具有優(yōu)良熒光性能,適合抗氧化過程示蹤與多酚吸收機(jī)制研究。
產(chǎn)品名稱:AF647標(biāo)記兒茶素,AF647-EGCG
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應(yīng)Alexa Fluor系列熒光分子染料,AF594(Alexa Fluor 594)是一種紅色熒光染料,AF594常以活性酯(如NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等形式出現(xiàn),便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價(jià)偶聯(lián)。其用于構(gòu)建熒光探針、生物傳感器、藥物遞送系統(tǒng)標(biāo)記、表面功能化及動(dòng)態(tài)過程追蹤等科研方向。
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