文獻(xiàn)：Preparation of DSPE-PEG-cRGD Modified Cationic Liposomes for Delivery of OC-2 shRNA and The Antitumor Effects on Breast Cancer

文獻(xiàn)鏈接：https://www.mdpi.com/1999-4923/14/10/2157

作者：by Chunyan Liu ?,Wenli Zhao ?ORCID,Ligang Zhang ?,Huamin Sun,Xi Chen andNing Deng *ORCID

裸脂質(zhì)體是通過(guò)凍干基質(zhì)水合（HFDM）方法制備的。將cRGD-CL（DOTAP、膽固醇、DMG-PEG2k、DSPE-PEG2k-cRGD，50:42:2:6，摩爾比）或CL（DOTAP，膽固醇、DMG-PEG 2k，50:52:8，摩爾比）的脂質(zhì)分別溶解在叔丁醇中，并與等體積的過(guò)濾蔗糖溶液（15mg/mL）混合。就FITC或DiR標(biāo)記脂質(zhì)體而言，將0.2%摩爾比的FITC或DiR碘化物加入混合物中。

然后，在-89°C的冷凝溫度和小于0.1毫巴的壓力下，將它們快速冷凍12小時(shí)并冷凍干燥72小時(shí)（Christ ALPHA 2-4LD plus）。將凍干粉溶解在無(wú)菌水中，輕輕搖晃，形成具有多分散流體動(dòng)力學(xué)直徑的脂質(zhì)體。為了縮小其尺寸分布，脂質(zhì)體在LiposoEasy LE-1（MoGe Machinery，Shanghai，China）中通過(guò)400nm和200nm聚碳酸酯膜擠出11次，或在冷水中用超聲波處理30分鐘。

使用Zetasizer Nano ZS90（Malvern Instruments，Malvern，UK）測(cè)量?jī)?yōu)化的空白脂質(zhì)體（cRGD-CL或CL）的流體動(dòng)力學(xué)直徑、多分散性（PDI）和ζ電位。通過(guò)測(cè)量在室溫下與H2O、PBS和10%FBS+DMEM孵育48小時(shí)期間的尺寸變化來(lái)評(píng)估cRGD CL的穩(wěn)定性。通過(guò)透射電子顯微鏡（TEM、FEI）觀察用1%磷鎢酸負(fù)染的cRGD-CL的形態(tài)。

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