文獻(xiàn)：以plectin-1為靶向的光學(xué)磁多模態(tài)成像技術(shù)對(duì)小鼠原位胰腺導(dǎo)管腺癌的精準(zhǔn)檢測(cè)

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作者：張文佳，梁小龍，梁祝，張新宇，金正宇，楊 度，田 杰，薛華丹

節(jié)選：

DSPE-PEG-PTP的合成

DSPE-PEG-PTP 是通過酰胺鍵將 PTP 的氨基與 DSPE-PEG-NHS 酯結(jié)合而合成的。28簡而言之，將 DSPE-PEG-NHS 和 PTP 以 1:2 的摩爾比在水性緩沖液（pH 8.5-9.0）中混合，然后在 37°C 下孵育 4 小時(shí)。使用分子量截留值為 8,000-14,000 的透析袋純化所得混合物以去除未結(jié)合的 PTP，凍干并在 -20°C 下儲(chǔ)存直至進(jìn)一步使用。DSPE-PEG-Con 以類似的方式合成。

PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW納米粒子的制備

PTP多肽序列為KTLLPTP（南京天肽生物科技有限公司）。對(duì)照多肽為隨機(jī)合成的多肽，其相對(duì)分子質(zhì)量與含有GTDYEW序列的PTP多肽（南京天肽生物科技有限公司）基本相同。采用自組裝法，通過疏水作用力制備PTP和IRDye800CW修飾的Fe 3 O 4。具體方法為：將油酸修飾的Fe 3 O 4與磷脂（其中DSPE-PEG-PTP、DSPE-IRDye800CW和DSPC的摩爾比為30:10:60）以1:2的質(zhì)量比混合于氯仿中，超聲攪拌以確保Fe 3 O 4充分溶解。隨后，用氮?dú)庠?5 °C下緩慢蒸發(fā)樣品，使其在小瓶上形成一層薄膜。隨后加入2 mL水，并劇烈超聲處理1小時(shí)。之后，用尼龍濾膜（0.45 ?m）過濾樣品，以去除較大的聚集體。將濾液離心（25,000 rpm，每次0.5小時(shí)，3次），收集PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW水相。通過熒光光譜和電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-OES）測(cè)定濾液、上清液和懸浮沉淀物，從而測(cè)定IRDye800CW和Fe 3 O 4的濃度。采用相同方法制備Con-Fe 3 O 4 -IRDye800CW納米顆粒。采用Zetasizer Nano ZS90儀器在室溫下測(cè)定PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW和Con-Fe 3 O 4 -IRDye800CW的zeta電位值。

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