TCO AF488(trans-Cyclooctene Alexa Fluor 488)是一種將環(huán)辛烯衍生物(TCO)與綠色熒光染料Alexa Fluor 488結(jié)合的生物偶聯(lián)試劑,專用于生物正交化學(xué)中的快速反應(yīng)體系。TCO是一種張力環(huán)烴,因其獨(dú)特的環(huán)張力結(jié)構(gòu),在無(wú)金屬催化的條件下可以與四嗪類分子(如Tetrazine)進(jìn)行快速、選擇性的Diels–Alder反應(yīng)。這種反應(yīng)速率快、專一性高,非常適合于活細(xì)胞或活體環(huán)境下進(jìn)行標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
Alexa Fluor 488作為綠色熒光染料,具有激發(fā)波長(zhǎng)約495 nm、發(fā)射波長(zhǎng)約519 nm,亮度高、光穩(wěn)定性好、背景信號(hào)低。與TCO偶聯(lián)后,可賦予熒光探針生物正交的標(biāo)記能力,使TCO AF488在細(xì)胞成像、蛋白標(biāo)記、代謝物示蹤及藥物遞送研究中顯示出極大的潛力。
在應(yīng)用上,TCO AF488主要用于與含四嗪官能團(tuán)的探針或生物大分子進(jìn)行偶聯(lián),實(shí)現(xiàn)高效且快速的生物正交標(biāo)記。相比傳統(tǒng)偶聯(lián)化學(xué),TCO-Tetrazine反應(yīng)不受復(fù)雜生物體系干擾,可在短時(shí)間內(nèi)完成,甚至適用于活細(xì)胞或活體中,實(shí)現(xiàn)無(wú)背景、高靈敏度的成像或檢測(cè)。
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