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          SCM-PEG-Biotin的純化與表征
          發(fā)布時間:2025-06-30     作者:wyh   分享到:

          產(chǎn)品名稱:SCM-PEG-Biotin的純化與表征

          關(guān)鍵反應(yīng)條件

          溶劑選擇:

          無水DMF或二氯甲烷(DCM),避免水分導(dǎo)致SCM或羥基水解。

          pH控制:

          SCM活化步驟需pH 7-9(避免碳酸酯質(zhì)子化),生物素與PEG連接步驟需pH 8.0(促進NHS酯反應(yīng))。

          溫度與時間:

          氯甲酸酯反應(yīng)需室溫進行,反應(yīng)時間4-6小時。

          反應(yīng)后需通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)試劑。

           純化與表征

          純化方法:

          制備型HPLC純化(C18柱,乙腈/水梯度洗脫),收集主峰產(chǎn)物。

          透析(截留分子量1 kDa)去除未反應(yīng)試劑(適用于低分子量雜質(zhì))。

          表征方法:

          質(zhì)譜(MS):確認分子量(理論MW≈SCM部分(161 Da)+ PEG部分(如2000 Da)+ Biotin部分(244 Da)≈2405 Da)。

          NMR:檢測生物素的噻吩環(huán)質(zhì)子(δ 4.3-4.5 ppm)、PEG的亞甲基質(zhì)子(δ 3.5-3.8 ppm)和SCM的琥珀酰亞胺質(zhì)子(δ 2.6-2.8 ppm)。

          紅外光譜(IR):觀察SCM的C=O伸縮振動(1740-1780 cm??)和生物素的噻吩環(huán)振動(1500-1600 cm??)。

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          SCM-PEG-Biotin

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