產(chǎn)品名稱:丹磺酰胺聚乙二醇馬來酰亞胺;Dansyl-PEG-MAL的純化與表征
關(guān)鍵反應(yīng)條件
溶劑選擇:
DMF或DMSO,避免水分導(dǎo)致MAL基團水解。
pH控制:
MAL活化步驟需pH 6.5-7.5(避免馬來酰亞胺水解),丹磺酰胺偶聯(lián)步驟需pH 8.0(促進親核取代)。
溫度與時間:
室溫反應(yīng)2小時(MAL活化),4℃過夜(偶聯(lián)反應(yīng))。
反應(yīng)后需通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)試劑。
純化與表征
純化方法:
制備型HPLC純化(C18柱,乙腈/水梯度洗脫),收集主峰產(chǎn)物。
透析(截留分子量1 kDa)去除未反應(yīng)試劑(適用于低分子量雜質(zhì))。
表征方法:
質(zhì)譜(MS):確認(rèn)分子量(理論MW≈丹磺酰胺部分(268 Da)+ PEG部分(如2000 Da)+ MAL部分(111 Da)≈2379 Da)。
NMR:檢測丹磺酰胺的芳香質(zhì)子(δ 7.0-8.5 ppm)、PEG的亞甲基質(zhì)子(δ 3.5-3.8 ppm)和MAL的乙烯基質(zhì)子(δ 6.7 ppm)。
熒光光譜:觀察丹磺酰胺的激發(fā)(λex≈340 nm)和發(fā)射(λem≈520 nm)波長。
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