英文名稱:AF514-galactose
中文名稱:AF514標(biāo)記半乳糖
AF514-galactose是一種由AlexaFluor 514熒光染料標(biāo)記的半乳糖衍生物。半乳糖(galactose)是一種單糖,廣泛存在于哺乳動(dòng)物乳汁、腦苷脂和糖蛋白中,是乳糖的組成成分之一。通過(guò)化學(xué)修飾將AF514與半乳糖結(jié)合,該復(fù)合物既保留了半乳糖的生物識(shí)別特性,又賦予其熒光標(biāo)記能力。AF514的激發(fā)波長(zhǎng)約為514 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為540 nm,屬于黃綠色熒光染料,具有較高的光穩(wěn)定性和熒光強(qiáng)度,適合在復(fù)雜生物環(huán)境中進(jìn)行檢測(cè)。
在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,AF514-galactose常用于研究糖-蛋白質(zhì)相互作用。半乳糖能夠特異性識(shí)別某些糖結(jié)合蛋白(如半乳糖凝集素),因此該標(biāo)記物可用于追蹤這些蛋白在細(xì)胞表面的分布或動(dòng)態(tài)變化。例如,在細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)中,AF514-galactose可作為探針標(biāo)記表達(dá)半乳糖結(jié)合受體的細(xì)胞,通過(guò)熒光顯微鏡觀察受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用或細(xì)胞間黏附過(guò)程。此外,該標(biāo)記物也可用于檢測(cè)糖代謝相關(guān)酶的活性,例如通過(guò)監(jiān)測(cè)半乳糖被酶催化后的熒光變化,間接反映酶的功能狀態(tài)。
在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中,AF514-galactose的標(biāo)記效率需通過(guò)質(zhì)譜或熒光分光光度計(jì)驗(yàn)證,以確保半乳糖與染料的結(jié)合比例符合預(yù)期。同時(shí),由于糖類(lèi)化合物易受溶液離子強(qiáng)度和pH影響,實(shí)驗(yàn)緩沖液需優(yōu)化以維持標(biāo)記物的穩(wěn)定性。值得注意的是,AF514-galactose的熒光信號(hào)可能受細(xì)胞內(nèi)還原性物質(zhì)(如谷胱甘肽)影響,因此在活細(xì)胞成像中需結(jié)合適當(dāng)?shù)膶?duì)照實(shí)驗(yàn)排除干擾。該標(biāo)記物為糖生物學(xué)研究提供了便捷的熒光工具,尤其在糖識(shí)別機(jī)制和疾病相關(guān)糖蛋白表達(dá)分析中具有應(yīng)用前景。
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