文獻(xiàn)：Recapitulating the Lateral Organization of Membrane Receptors at the Nanoscale

作者：Seyed R. Tabaei*Marcos Fernandez-VillamarinSetareh VafaeiLorcan RooneyPaula M. Mendes

文獻(xiàn)鏈接：https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acsnano.3c00683

我們合成了各種功能性的二乙炔單體，以制備可光聚合的脂質(zhì)體，作為糖在脂質(zhì)膜表面分子印跡的平臺(tái)。該受體結(jié)合了一個(gè)由四個(gè)親水性低聚（乙二醇）單元組成的間隔鏈，使BA更容易在膜界面上與糖接觸。

PCDA-PEG-BA單體是通過N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）PCDA衍生物與二氨基PEG直接反應(yīng)，然后使用N-乙基-N′-（3-（二甲氨基）丙基）碳二亞胺（EDC）和NHS將產(chǎn)物與3-羧基苯基硼酸反應(yīng)而獲得的�；蛘�，也合成了一種不含PEG的受體，以測(cè)試接頭效應(yīng)。PCDA-BA是通過EDC直接將3-氨基苯基硼酸偶聯(lián)到PCDA分子上而獲得的。

最后，使用不含BA的單體作為可聚合基質(zhì)脂質(zhì)，與BA官能化單體結(jié)合構(gòu)建脂質(zhì)體。PCDA-PEG也是通過NHS PCDA衍生物與（2-（2-甲氧基乙氧基）乙基）胺之間的直接反應(yīng)獲得的。

通過在高于PCDAs相變溫度（Tm）的80°C下超聲處理制備所需組成的脂質(zhì)體。為了印跡，脂質(zhì)體在pH 10的溫度下與模板糖一起孵育1小時(shí)，然后在4°C下儲(chǔ)存24小時(shí)。

然后用254 nm紫外光照射透明溶液。以相同的方式制備非壓縮脂質(zhì)體，不與模板孵育�？傊�質(zhì)濃度通常在0.5至2 mM之間，因?yàn)楦�高的濃度�?huì)導(dǎo)致PCDA從溶液中沉淀出來。根據(jù)脂質(zhì)組成，官能化PDA脂質(zhì)體的平均直徑為200±59.9 nm。

表面等離子體共振（SPR）光譜用于評(píng)估糖與脂質(zhì)體的結(jié)合親和力。我們將生物素化脂質(zhì)（DMPE-PEG-生物素）摻入脂質(zhì)體制劑中，并通過生物素-中和素-生物素夾心連接將其固定在金表面。

為了評(píng)估糖結(jié)合，從不含脂質(zhì)體的表面上減去不同濃度糖的SPR響應(yīng)（圖2B和C）。采用四糖水蘇糖作為印跡模板。使用水蘇糖和單糖果糖作為對(duì)照，研究了印跡和非印跡脂質(zhì)體的結(jié)合行為。

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