DSPE-PEG-標(biāo)簽肽定制合成技術(shù)
一、概述:
DSPE-PEG(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-聚乙二醇)是一種兩親性分子,其疏水DSPE鏈嵌入脂質(zhì)體或細(xì)胞膜,親水PEG鏈延伸至外部,末端可功能化修飾,如結(jié)合標(biāo)簽肽(Tag Peptide)。標(biāo)簽肽(如His-tag、FLAG、HA、Myc等)常用于蛋白純化、成像或定位標(biāo)記。通過DSPE-PEG修飾標(biāo)簽肽,可實現(xiàn)靶向、識別或檢測功能,廣泛應(yīng)用于納米藥物、生物探針和分子追蹤系統(tǒng)中。
二、定制合成技術(shù)流程:
肽序列設(shè)計與合成:
根據(jù)所需標(biāo)簽肽(如6×His, HA, FLAG等)確定氨基酸序列,利用固相肽合成技術(shù)(SPPS)進(jìn)行合成。合成時可在N端或C端引入修飾基團(tuán)(如-NH?, -COOH, -Cys)。
功能基團(tuán)引入:
通常在肽鏈上引入巰基(Cys)、氨基或羧基,以便與DSPE-PEG官能團(tuán)反應(yīng)。
例如:
**DSPE-PEG-Maleimide(Mal)**適合與肽鏈上的巰基(Cys)發(fā)生Michael加成;
DSPE-PEG-NHS可與肽鏈上的游離氨基縮合;
DSPE-PEG-COOH可用于EDC/NHS活化后與氨基偶聯(lián)。
共軛反應(yīng)與純化:
在適當(dāng)pH(如pH 6.5~7.5)下進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng);
使用HPLC、透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)物;
確認(rèn)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)可通過MALDI-TOF、NMR 或 FTIR。
表征與應(yīng)用驗證:
對合成的DSPE-PEG-Tag進(jìn)行粒徑、zeta電位檢測;生物系統(tǒng)中評估其靶向性、識別能力及穩(wěn)定性。
三、試劑推薦:
試劑名 | 推薦規(guī)格/說明 |
DSPE-PEG2000-Mal | 用于巰基標(biāo)簽肽(Cys-tag)共軛 |
DSPE-PEG-NHS | 用于氨基標(biāo)簽肽偶聯(lián) |
Cys-His?、Cys-FLAG、Cys-HA | 標(biāo)簽肽引入巰基,便于連接 |
DMSO、PBS、HEPES buffer | 溶解與反應(yīng)體系 |
TFA、ACN | 肽合成與純化溶劑 |
HPLC柱、透析袋(MWCO 3.5kDa) | 用于產(chǎn)物純化 |
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西安pg電子官方生物科技有限公司專注于功能化玻片,脂質(zhì)體,納米材料,熒光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素類試劑、共聚物及光電功能材料等各種科研材料的定制合成服務(wù)。
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