具有不同碳鏈長度的香豆素類熒光探針定制技術(shù)
一、技術(shù)概述
香豆素類熒光探針具有高量子產(chǎn)率、良好的細(xì)胞滲透性和結(jié)構(gòu)可調(diào)控性。通過引入不同碳鏈長度(如–(CH?)n–,n = 2, 4, 6, 8, 12)可調(diào)控其親疏水性、自組裝能力、靶向性或跨膜性能,廣泛用于成像探針、熒光納米粒子修飾及FRET構(gòu)建等。
二、結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)策略
母體選擇:常用香豆素骨架有:
7-羥基香豆素(7-hydroxycoumarin)
7-氨基香豆素(7-amino-4-methylcoumarin)
芳基取代香豆素(6,8位修飾)
碳鏈插入位置:
連接于7位羥基或氨基處
通過酯化、酰胺化形成結(jié)構(gòu)如下:
Coumarin–O–(CH?)n–X 或 Coumarin–NH–(CH?)n–X
功能化端基設(shè)計(jì):
末端可接:疏水長鏈(烷基)、親水基(羧基、PEG)、靶向配體等
可用于構(gòu)建兩親性自組裝探針或細(xì)胞靶向染料
三、合成流程示意
醇/胺型碳鏈(如HO–(CH?)n–X)通過DCC/DMAP或EDC/NHS與香豆素母體反應(yīng)
反應(yīng)體系為DCM、DMF或THF
反應(yīng)溫度:室溫40℃,時(shí)間612h
TLC監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程,柱層析或HPLC純化
四、調(diào)控性能
碳鏈越長,疏水性增強(qiáng),可促進(jìn)膜穿透或膠束嵌入
中碳鏈(n=6~8)常用于兩親性結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),適合生物應(yīng)用
短鏈探針更適合水相穩(wěn)定熒光系統(tǒng)
五、試劑與工具推薦
試劑 | 用途 |
7-hydroxycoumarin, AMC | 熒光母體 |
HO–(CH?)n–COOH, NH?–(CH?)n–OH | 不同碳鏈長度連接臂 |
DCC/DMAP、EDC/NHS | 偶聯(lián)劑 |
HPLC、NMR、UV-Fluorescence | 表征方法 |
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