ATTO 425-TSA 是一款基于 tyramide（酪胺）化學(xué)放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）技術(shù)的熒光探針試劑，結(jié)合了高亮度、高光穩(wěn)定性的 ATTO 425 熒光染料與 tyramide 分子，通過(guò)過(guò)氧化物酶（通常是辣根過(guò)氧化物酶，HRP）催化下的共價(jià)標(biāo)記機(jī)制，提高了免疫檢測(cè)、原位雜交（ISH）、免疫組織化學(xué)（IHC）、以及細(xì)胞成像等生物實(shí)驗(yàn)中的檢測(cè)靈敏度。該試劑具有出色的光學(xué)性能，是現(xiàn)代分子生物學(xué)和病理學(xué)研究中一種重要的熒光信號(hào)放大工具。

ATTO 425 染料的特性

ATTO 425 是一種高性能的藍(lán)綠色熒光染料，激發(fā)波長(zhǎng)約 436 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約 484 nm，發(fā)射光譜呈現(xiàn)亮麗的藍(lán)綠色，熒光量子產(chǎn)率高，具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性，適合高分辨率成像及多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。與傳統(tǒng)染料（如 Alexa Fluor 430、DyLight 405 等）相比，ATTO 425 在水相環(huán)境中具備更高的熒光強(qiáng)度和耐光漂白能力，可在長(zhǎng)期成像中提供穩(wěn)定、可靠的信號(hào)。

Tyramide Signal Amplification (TSA) 技術(shù)原理

TSA 技術(shù)的核心是利用過(guò)氧化物酶催化 tyramide 衍生物的活化，使其生成高活性的自由基。這些自由基在短時(shí)間內(nèi)迅速與周?chē)�的酪氨酸殘基或其他蛋白質(zhì)中的芳香族氨基酸發(fā)生共價(jià)結(jié)合，將熒光分子牢固地“沉積”在靶位點(diǎn)附近。這樣，一分子 HRP 可催化數(shù)百甚至上千個(gè) tyramide 分子的沉積，增強(qiáng)檢測(cè)信號(hào)，實(shí)現(xiàn)超高靈敏度檢測(cè)。

相較于傳統(tǒng)的二級(jí)體熒光標(biāo)記法，TSA 可將信號(hào)增強(qiáng)數(shù)倍甚至數(shù)百倍，尤其適用于檢測(cè)低豐度靶標(biāo)或進(jìn)行多重?zé)晒馊旧�。由于共價(jià)結(jié)合的特性，TSA 也具備較強(qiáng)的耐洗滌能力，減少背景噪聲，提升成像清晰度。

ATTO 425-TSA 的應(yīng)用

免疫組織化學(xué) (IHC)
ATTO 425-TSA 可用于組織切片染色，特別適合需要檢測(cè)低表達(dá)蛋白的病理或研究樣本。其高信噪比有助于清晰區(qū)分靶標(biāo)和背景。

原位雜交 (ISH)
在 RNA 或 DNA 的原位雜交實(shí)驗(yàn)中，ATTO 425-TSA 提供了出色的靈敏度，便于檢測(cè)微量核酸分子，如信使 RNA（mRNA）、非編碼 RNA（lncRNA）或微小 RNA（miRNA）。

多重?zé)晒鈽?biāo)記
ATTO 425 的藍(lán)綠色發(fā)射波段適合與其他熒光染料（如 Cy3、Cy5、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647 等）配合，進(jìn)行多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，無(wú)串色干擾，可實(shí)現(xiàn)精確的多靶標(biāo)檢測(cè)。

流式細(xì)胞術(shù)
雖然 TSA 主要用于固定組織或細(xì)胞，部分研究也將其應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)，提高檢測(cè)靈敏度，尤其是在分析稀有細(xì)胞群時(shí)。

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