AF568-TSA，即 Alexa Fluor 568 Tyramide，是一種以Alexa Fluor 568熒光染料為核心的酪胺（tyramide）衍生物，屬于信號放大技術(shù)（Tyramide Signal Amplification, TSA）體系的重要試劑之一。它結(jié)合了高亮度熒光染料和高反應(yīng)活性的酪胺結(jié)構(gòu)，廣泛用于免疫檢測、原位雜交（ISH）、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）以及多重?zé)晒馊旧�等生物學(xué)研究與診斷領(lǐng)域。

從分子結(jié)構(gòu)上來看，AF568-Tyramide 是由 Alexa Fluor 568 熒光團(tuán)通過碳鏈或短連接臂與酪胺（tyramine 或類似結(jié)構(gòu)）偶聯(lián)而成。Alexa Fluor 568 是一種基于羅丹明（rhodamine）類結(jié)構(gòu)的熒光染料，發(fā)射波長在 603 nm 左右，激發(fā)波長約為 578 nm，呈現(xiàn)明亮的橙紅色熒光，具有高的量子產(chǎn)率與光穩(wěn)定性。相比傳統(tǒng)羅丹明、Texas Red 等染料，Alexa Fluor 568 對光漂白的耐受性顯著提高，尤其適用于熒光成像、共聚焦顯微鏡等需要長時間曝光或高功率激發(fā)的實驗條件。

AF568-TSA 的核心技術(shù)依賴于 Tyramide信號放大機(jī)制（TSA）。在此系統(tǒng)中，首先利用辣根過氧化物酶（HRP, horseradish peroxidase）與靶標(biāo)（如抗體或探針）的結(jié)合，將HRP定位于目標(biāo)區(qū)域。隨后加入含有 AF568-Tyramide 和微量過氧化氫的工作液，HRP 會催化過氧化氫分解產(chǎn)生高活性的酪胺自由基。這些自由基易與周圍蛋白質(zhì)中的酪氨酸殘基發(fā)生共價結(jié)合，從而使 Alexa Fluor 568 分子牢固地“沉積”在靶標(biāo)附近，大大增強(qiáng)熒光信號。這種放大效果能將檢測靈敏度提升至常規(guī)免疫檢測的10倍甚至上百倍，尤其適用于低豐度靶標(biāo)的檢測。

與其他熒光染料相比，Alexa Fluor 568 具有多項優(yōu)異特性：

高亮度與高量子產(chǎn)率：發(fā)射光強(qiáng)強(qiáng)烈，即使在微弱信號下也易于檢測。

光穩(wěn)定性：在高強(qiáng)度光照下不易漂白，適合長時間觀察。

pH穩(wěn)定性：熒光在較寬的 pH 范圍內(nèi)保持穩(wěn)定。

良好的水溶性：減少非特異性結(jié)合與背景噪音。

與常見激光線兼容：可被 561 nm 或 568 nm 激光有效激發(fā)，適用于多色熒光實驗。

在實際應(yīng)用中，AF568-TSA 主要用于以下場合：

免疫組織化學(xué)（IHC）：用于組織切片染色，檢測特定蛋白或抗原。

原位雜交（ISH）：檢測組織或細(xì)胞中的 RNA、DNA 序列，尤其是在病毒檢測、癌癥標(biāo)志物分析中有廣泛應(yīng)用。

免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）：用于細(xì)胞培養(yǎng)物中靶標(biāo)分子的定位與定量。

多重染色實驗：由于其發(fā)射波長與其他染料（如 AF488, AF647）區(qū)分度高，可用于多重標(biāo)記分析。

相關(guān)推薦：

CAS：1847485-97-5，ATP-Red 1

TechnoDye 502/512

3,5-Dimethyl-BDP ，3,5-Dimethyl BDP

ROX NH2, 6-isomer，ROX amine, 6-isomer

BDP FL L-Cystine

2500973-94-2，AF 488 hydrazide

AF568 DBCO，Alexa Fluor568 DBCO

Pyrene hydrazide 芘酰肼

2183440-65-3，F(xiàn)AM hydrazide, 6-isomer