文獻(xiàn)：HER2特異性Affibody結(jié)合熱敏脂質(zhì)體（Affisomes）用于改善*癌藥物的遞送

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作者：阿努·普里，加布里埃拉·克萊默-馬雷克，瑞安·坎貝爾-馬薩，阿米哈伊·亞夫洛維奇，施里坎特·C·特萊，李相奉，杰弗里·D·克洛斯頓，阿尼爾·K·帕特里，羅伯特·布盧門撒爾&雅采克·卡帕拉

節(jié)選：

熱敏脂質(zhì)體是將藥物遞送和釋放至*的有效載體。為了提高其對乳腺癌*的靶向性，將8.3 kDa HER2特異性Affibody分子(Z HER2:342 -Cys)修飾到脂質(zhì)體表面。研究了這種修飾對所得納米顆粒（稱為“Affisomes”）的物理特性和穩(wěn)定性的影響。通過探針超聲處理制備了直徑(80-100 nm)的溫敏性小單層囊泡(SUV)脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體由二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC，Tm 41°C)作為基質(zhì)脂質(zhì)，并由馬來酰亞胺偶聯(lián)的聚乙二醇化磷脂(DSPE-MaL-PEG2000)組成。將熒光探針摻入脂質(zhì)體中，用于生物物理和/或生化分析和/或觸發(fā)釋放分析。在氬氣氣氛下，通過在還原劑（例如三丁基膦）存在下孵育 16-20 小時，將 Affibody 通過其 C 端半胱氨酸與這些脂質(zhì)體結(jié)合。在還原條件下，在 4-12％ Bis/Tris 凝膠上可見脂質(zhì)結(jié)合的 Affibody 分子為 11.3 kDa 帶。在蛋白質(zhì)-脂質(zhì)比為 20 μg/mg 時，Affibody 結(jié)合產(chǎn)率約為 70％，每個 Affisome 平均有 200 個 Affibody 分子。Affibody 與熱敏脂質(zhì)體的結(jié)合對脂質(zhì)體的流體動力學(xué)尺寸分布沒有任何顯著影響。通過監(jiān)測包裹的鈣黃綠素（一種水溶性熒光探針，λex/em 490/515 nm）的釋放隨溫度的變化來確定 Affisome 的熱敏性。鈣黃綠素以溫度依賴性方式從親和體（含有親和體靶向SUV的熱敏脂質(zhì)體）和非靶向SUV（不含親和體的熱敏脂質(zhì)體）中釋放，在41°C時泄漏率*高（90-100%）。相反，在類似條件下由蛋磷脂酰膽堿（蛋PC，Tm ～0°C）制備的脂質(zhì)體在41°C時僅釋放5-10%的鈣黃綠素。在室溫下儲存時，親和體可在長達(dá)7天內(nèi)保留> 90%的包封鈣黃綠素。此外，將脂質(zhì)體在添加了10%熱滅活血清（胎牛血清）的磷酸鹽緩沖液中孵育，不會導(dǎo)致脂質(zhì)體不穩(wěn)定。因此，親和體是一種有希望的、用于乳腺癌靶向*的新型藥物遞送候選物。

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