AF647 Streptavidin，全稱 Alexa Fluor 647 Streptavidin，是現(xiàn)代分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)以及醫(yī)學(xué)研究中為常用的熒光偶聯(lián)探針。它結(jié)合了鏈霉親和素（Streptavidin）超強(qiáng)的生物素結(jié)合能力，以及Alexa Fluor 647染料卓越的熒光性能，成為多種檢測與成像實(shí)驗(yàn)的核心試劑。憑借其高靈敏度、低背景、優(yōu)異的光穩(wěn)定性和適合深部組織成像的遠(yuǎn)紅外熒光特性，AF647 Streptavidin 廣泛應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡、Western blot、ELISA、免疫組織化學(xué)及其他生物偶聯(lián)檢測系統(tǒng)。

AF647 Streptavidin 結(jié)構(gòu)與性能

AF647 Streptavidin 是通過將Alexa Fluor 647共價(jià)偶聯(lián)到鏈霉親和素蛋白上的熒光探針。制備過程通常采用 NHS 酯化學(xué)，將 Alexa Fluor 647 NHS 酯與 Streptavidin 蛋白的賴氨酸殘基共價(jià)連接，確保染料與蛋白質(zhì)之間形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。

其性能特點(diǎn)包括：

與生物素結(jié)合能力不受標(biāo)記影響，結(jié)合位點(diǎn)完全保留

高偶聯(lián)度（通常約每個(gè)鏈霉親和素四聚體偶聯(lián) 3~7 個(gè)染料分子）

熒光信號(hào)強(qiáng)，靈敏度高

在常見緩沖液和實(shí)驗(yàn)條件下化學(xué)穩(wěn)定

與各種生物素化合物兼容，包括抗體、寡核苷酸、蛋白質(zhì)、小分子探針等

主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry）

AF647 Streptavidin 是流式細(xì)胞術(shù)中檢測生物素化抗體或探針的理想選擇。其遠(yuǎn)紅熒光避免了與 FITC、PE 等染料的光譜重疊，適合多色檢測實(shí)驗(yàn)。

2. 熒光顯微鏡成像

在共聚焦顯微鏡、超分辨顯微鏡（如 STED、SIM、PALM/STORM）等高端成像技術(shù)中，AF647 Streptavidin 提供高的光穩(wěn)定性和亮度，適合需要長時(shí)間曝光或多次掃描的實(shí)驗(yàn)。

3. 免疫組化與免疫熒光染色

用于組織切片染色，結(jié)合生物素化一抗或探針，通過 AF647 的遠(yuǎn)紅熒光減少組織自發(fā)熒光，提高檢測靈敏度，尤其適合厚組織或深層組織成像。

4. ELISA 與 Western blot

AF647 Streptavidin 可作為檢測分子，用于識(shí)別生物素標(biāo)記的抗體或探針，實(shí)現(xiàn)熒光檢測。

5. 核酸雜交實(shí)驗(yàn)

結(jié)合生物素標(biāo)記的寡核苷酸探針，實(shí)現(xiàn)高靈敏度核酸檢測，如 FISH 實(shí)驗(yàn)。

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