文獻:Tumour targeted contrast enhanced ultrasound imaging dual-modal microbubbles for diagnosis and treatment of triple negative breast cancer
作者:Min Bai? a, Yang Dong?b, Hui Huangb, Hao Fub, Yourong DuanORCID logob, Qi WangORCID logo*c and Lianfang Du*a
文獻鏈接:https://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2017/sc/c8ra09737b
DPPE-PEG-RGD的合成與表征
首先,將RGD(6.62 mmol)、EDC(7.28 mmol)和NHS(7.94 mmol)溶解在10 mL DMSO溶液中。在25°C下攪拌混合物1小時后,將DPPE-PEG-NH2(5.94 mmol)加入溶液中。
各組分的摩爾比為RGD[薄空間(1/6-em)]:[薄空間。將混合溶液在室溫下攪拌反應8小時。其次,使用透析袋(Mw:2000)用1000mL蒸餾水透析溶液,以去除剩余的RGD肽(Mw:754)。真空干燥后,獲得黃色粉末狀DPPE-PEG-RGD,并儲存在-20°C下。
通過核磁共振(NMR)光譜證實了DPPE-PEG-RGD的化學結構。
PTX負載RGD脂質微泡的制備(PTX@RGD-MBs)
起初PTX@RGD-MBs使用薄膜水合法制備。將2 mg DPPE-PEG-RGD、250μg膽固醇、500μg DPPC和0.1 mg PTX溶解在2 mL三氯甲烷溶液(PTX 0.05 mg mL?1)中,通過旋轉蒸發(fā)形成混合膜。然后,加入5 mL PBS溶液,在37°C下使薄膜水合30分鐘。接下來,溶液通過超聲波處理器(JY92-2D超聲波細胞破碎機,寧波斯琴茨生物技術有限公司)進行60秒(2-2s 400 W)的超聲波分散。然后將脂質顆粒溶液冷凍干燥并置于20mL真空安培瓶中。將10mL SF6和5mL生理鹽水注入安培瓶中,然后劇烈搖晃瓶子,直到凍干粉末完全分散,得到PTX@RGD-MBs溶液(PTX的濃度為0.02 mg mL?1)。為了滿足不同實驗的要求,在制備過程中PTX@RGD-MBs,用50μg Rb(羅丹明B,紅色熒光探針)代替PTX制備Rb@RGD-MBs(Rb的濃度為10μg mL-1)。
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