文獻(xiàn)：In Vitro Evaluation of DSPE-PEG (5000) Amine SWCNT Toxicity and Efficacy as a Novel Nanovector Candidate in Photothermal 作者：Therapy by Response Surface Methodology (RSM)

by Naghmeh Hadidi 1,*ORCID,Niloufar Shahbahrami Moghadam 2,Gholamreza Pazuki 3,Parviz Parvin 4 andFatemeh Shahi 4

文獻(xiàn)鏈接：https://www.mdpi.com/2073-4409/10/11/2874

將所選細(xì)胞系A(chǔ)549、HEPG2和SKOV3用不同濃度的DSPE-PEG（5000）胺單壁碳納米管處理24小時(shí)。將HEFG2和A549細(xì)胞轉(zhuǎn)移到96孔板中，細(xì)胞密度為1×104個(gè)細(xì)胞/孔。

將SKOV3細(xì)胞轉(zhuǎn)移到96孔板中，細(xì)胞密度為5×103個(gè)細(xì)胞/孔。在培養(yǎng)基中制備各種濃度的測(cè)試材料，包括純SWCNT和DSPE-PEG（5000）胺SWCNT，使每個(gè)孔的最終濃度達(dá)到0、25、50、100、200、400和600μg/mL。

然后將細(xì)胞在37°C下與測(cè)試材料在5%CO2加濕培養(yǎng)箱（Astecc AV114C，英國(guó)）中孵育24小時(shí)。倒置顯微鏡觀察形態(tài)學(xué)變化。臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)用于評(píng)估非功能化和功能化SWCNT對(duì)細(xì)胞存活率的影響。在暴露于純和DSPE-PEG（5000）胺SWCNT后24和72小時(shí)，通過(guò)在Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)細(xì)胞來(lái)測(cè)量細(xì)胞增殖和活細(xì)胞數(shù)量。

進(jìn)行TEM分析以評(píng)估SKOV3對(duì)DSPE-PEG（5000）胺單壁碳納米管（25?g/mL）的攝取。 [44].SKOV3細(xì)胞用DSPE-PEG（5000）胺單壁碳納米管處理24小時(shí)后，用3%戊二醛中固定2×105個(gè)細(xì)胞過(guò)夜。脫水和樹(shù)脂包埋后，使用RMC MT-7000超薄切片機(jī)制備SKOV3的超薄切片（80 nm厚），用乙酸鈾酰和檸檬酸鉛染色，并在50 KV下用蔡司EM900 TEM檢查[44]。

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