產(chǎn)品名稱：C18-PEG-DBCO/BIOTIN的逐步偶聯(lián)法

合成方法

C18-PEG-DBCO的制備核心是將C18、PEG與DBCO通過化學(xué)鍵連接，常用方法包括：

1. 逐步偶聯(lián)法

步驟：

C18-PEG合成：將硬脂酸（C18）與PEG通過酯化或酰胺化反應(yīng)連接。

酯化反應(yīng)：C18與PEG-COOH在EDC/NHS催化下反應(yīng)，生成C18-PEG-COO-。

酰胺化反應(yīng)：C18-NH?與PEG-COOH在EDC/NHS催化下反應(yīng)，生成C18-PEG-NH-。

DBCO偶聯(lián)：將C18-PEG與DBCO-NHS酯在PBS（pH 7.4）中反應(yīng)，生成C18-PEG-DBCO。

純化：通過透析（截留分子量：3000 Da）或凝膠滲透色譜（GPC）去除未反應(yīng)原料。

優(yōu)勢：反應(yīng)條件溫和，產(chǎn)物純度高（>95%）。

2. 點(diǎn)擊化學(xué)法（SPAAC）

原理：若PEG預(yù)先修飾疊氮基（PEG-N?），可通過無銅點(diǎn)擊反應(yīng)（SPAAC）與DBCO修飾的C18（C18-DBCO）連接。

步驟：

C18-DBCO合成：通過酰胺化反應(yīng)將DBCO連接到C18。

PEG-N?合成：通過化學(xué)交聯(lián)（如Azido-PEG-NHS）將疊氮基引入PEG。

點(diǎn)擊反應(yīng)：在PBS（pH 7.4）中，C18-DBCO與PEG-N?反應(yīng)，生成C18-PEG-DBCO。

優(yōu)勢：反應(yīng)快速（30分鐘內(nèi)完成），無需催化劑，結(jié)合效率高（>90%）。

3. 固相合成法

原理：利用固相載體（如樹脂）逐步連接C18、PEG與DBCO，適用于大規(guī)模生產(chǎn)。

步驟：

樹脂活化：將C18通過酯鍵或酰胺鍵固定于樹脂表面。

PEG延伸：通過重復(fù)的偶聯(lián)-去保護(hù)步驟延長PEG鏈。

DBCO偶聯(lián)：將DBCO-NHS酯連接到PEG末端。

切割與純化：用TFA（三氟乙酸）切割產(chǎn)物，通過HPLC純化。

優(yōu)勢：產(chǎn)率高（>80%），適合工業(yè)化生產(chǎn)。

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