AF488標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物,AF488-Streptavidin的反應(yīng)機理
AF488標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-AF488)是一種將高親和力生物素結(jié)合蛋白鏈霉親和素與Alexa Fluor 488熒光染料偶聯(lián)的生物探針,常用于免疫熒光染色、熒光原位雜交(FISH)、細胞標(biāo)記、組織成像及其他生物學(xué)檢測中。AF488是一種綠色熒光染料,具有高量子產(chǎn)率與光穩(wěn)定性,激發(fā)/發(fā)射峰值為495/520 nm,適合與常規(guī)FITC通道兼容的熒光顯微成像。
該偶聯(lián)物的合成基于AF488-NHS酯與鏈霉親和素表面可及的賴氨酸殘基反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價酰胺鍵。該反應(yīng)是一種典型的N-;磻(yīng),其機理為:NHS酯在堿性環(huán)境中被賴氨酸ε-氨基的親核攻擊,羧酸活性酯斷裂后釋放NHS并形成酰胺鍵。該反應(yīng)對水敏感,需在無水DMSO中溶解染料后迅速加入緩沖液中的蛋白溶液中。反應(yīng)體系pH維持在8.3~8.5,以增強氨基的親核性,同時避免蛋白變性。
反應(yīng)后采用分子篩柱(如Sephadex G-25)或透析去除游離染料,確保偶聯(lián)產(chǎn)物的純度和信噪比。每個鏈霉親和素分子含有四個位點可結(jié)合生物素,其高親和力(Kd ~10^-15 M)使其在二級檢測體系中成為理想工具,能夠與生物素標(biāo)記的抗體、核酸、脂質(zhì)等靶標(biāo)高效結(jié)合,放大信號。
AF488標(biāo)記的鏈霉親和素應(yīng)避光保存于4°C,并避免反復(fù)凍融以保持熒光活性和結(jié)合力。其應(yīng)用特點包括背景低、信號強、通道兼容性好,在細胞與組織標(biāo)記、熒光雙標(biāo)、微陣列等平臺均表現(xiàn)優(yōu)異。
產(chǎn)品名稱:AF488標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物,AF488-Streptavidin
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機溶劑。
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯(lián)。
推薦產(chǎn)品:
隱花青 4727-50-8 注意避光避濕保存
吲哚菁綠-氨基
1686147-55-6
ICG-NH2
鋅離子熒光探針(Zinquin乙酯) 151606-29-0 Zinquin ethyl ester
線粒體膜電位探針 3520-43-2 JC-1用于檢測線粒體膜電位
僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23