6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯,92557-81-8,6-FAM NHS ester的反應條件
6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(6-FAM NHS ester)是一種常用的綠色熒光染料活性酯,屬于熒光素類染料。該化合物激發(fā)波長約為495 nm,發(fā)射波長為520 nm,發(fā)出明亮的綠色熒光,常被用于標記寡核苷酸、蛋白質(zhì)、抗體和聚合物等生物分子。
其活性基團為NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester),可專一性地與分子中的伯胺反應,生成穩(wěn)定的酰胺鍵。這種反應通常在無金屬離子的條件下,于pH 7.5–8.5的緩沖液中進行,例如碳酸鹽緩沖液或HEPES緩沖液。適反應溫度為室溫,時間控制在30分鐘至1小時內(nèi)即可達到較高結(jié)合效率。
反應條件關(guān)鍵要點如下:
溶劑選擇:6-FAM NHS ester 對濕氣敏感,需溶于無水DMSO或DMF中,并立即加入到含有目標胺基分子的緩沖液中。反應期間避免暴露于高濕環(huán)境。
pH控制:在堿性條件下(pH 8.0左右),NHS酯反應為高效,且能避免羧基的自水解。應避免使用Tris等含胺緩沖液,以免與NHS反應競爭。
比例與濃度:推薦使用染料與目標分子的摩爾比為3:1至10:1,以確保完全標記。多余染料可通過HPLC、凝膠過濾等方式移除。
避光反應:為防止熒光素光漂白,反應應在避光條件下進行。
6-FAM NHS ester 所標記的分子在各種熒光檢測平臺上具有高靈敏度表現(xiàn),常用于RT-PCR、FISH探針構(gòu)建、蛋白質(zhì)電泳、胞內(nèi)定位實驗等,是綠色熒光通道中的經(jīng)典染料之一。
中文名稱: 6-羧基熒光素琥珀酰亞胺醚
MF: C25H15NO9
MW: 473.39
CAS: 92557-81-8
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機溶劑。
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯(lián)。
推薦產(chǎn)品:
CY3-CPP
CY3-CTT2
CY3-CCK8
CY3-GE11
CY3-RVG29
CY3-YIGSR
CY3-WSW(WSWGPYSC)
僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23