名稱：Atto 425 NHS Ester

中文名：Atto 425-N-羥基琥珀酰亞胺酯

類別：熒光染料活性酯

分子特征：Atto 425是一種藍光激發(fā)的熒光染料，帶有NHS（N-hydroxysuccinimide）活性酯，可與胺基（如蛋白質(zhì)、抗體、肽鏈中的賴氨酸殘基）發(fā)生共價結(jié)合。

化學(xué)性質(zhì)

Atto 425 NHS Ester 結(jié)構(gòu)中含有NHS活性酯基團，能在溫和條件下特異性地與初級胺反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。這種化學(xué)修飾方式廣泛用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、多肽和其他含氨基的生物分子。

Atto 425染料具有高量子產(chǎn)率、優(yōu)良的光穩(wěn)定性和亮度，適用于多種熒光檢測技術(shù)。

應(yīng)用范圍

蛋白質(zhì)和抗體標(biāo)記：通過NHS酯與蛋白質(zhì)賴氨酸殘基的胺基共價結(jié)合，制備熒光標(biāo)記抗體。

細胞成像：標(biāo)記細胞表面蛋白或細胞內(nèi)蛋白，進行熒光顯微鏡觀察。

流式細胞術(shù)：用作熒光探針，分析細胞群體。

免疫熒光分析：提高檢測靈敏度和信號特異性。

分子相互作用研究：作為示蹤劑用于結(jié)合動力學(xué)和空間分布研究。

五、使用注意事項

該試劑對水分敏感，保存應(yīng)避光、干燥，低溫冷藏。

標(biāo)記反應(yīng)需在堿性緩沖液（pH約7.5-8.5）中進行，以保證胺基的活性。

標(biāo)記完成后，需及時去除未反應(yīng)的游離染料，以減少背景信號。

在活細胞標(biāo)記時應(yīng)注意細胞毒性和染料濃度的優(yōu)化。

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