產(chǎn)品概述與作用機理
ATTO647N NHS酯是一種用于共價標(biāo)記生物分子的近紅外熒光染料,其結(jié)構(gòu)中含有一個高反應(yīng)性的N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHS ester)基團,可與蛋白質(zhì)、多肽、寡核苷酸或其他含伯胺(-NH?)基團的分子發(fā)生酰胺化反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價鍵。
ATTO647N一種性能優(yōu)越的熒光染料,屬于遠紅外染料系列,具有高光穩(wěn)定性、高量子產(chǎn)率和低背景熒光等優(yōu)點。其吸收波長約為 644 nm,發(fā)射波長約為 669 nm,適合用于共聚焦顯微鏡、流式細胞術(shù)(FACS)、單分子檢測(smFRET)、超分辨成像(如 STED、PALM、dSTORM)等技術(shù)。
中文名稱: ATTO 647琥珀酰亞胺酯
MF: C46H55N4O5+
MW: 743.97
CAS: 1351519-86-2
生物標(biāo)記:
ATTO647N NHS酯是生物標(biāo)記的理想工具,可高效地標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)、肽、小分子、核酸等。其活性酯結(jié)構(gòu)專一性強,能選擇性與蛋白質(zhì)的賴氨酸殘基發(fā)生反應(yīng),而不破壞蛋白質(zhì)的構(gòu)象。
熒光成像:
在共聚焦顯微鏡、TIRF顯微鏡、STED成像等熒光成像平臺中,ATTO647N提供強的信號強度和優(yōu)良的信噪比,尤其適合對活細胞或固定細胞中的特定結(jié)構(gòu)進行高分辨率觀察。
流式細胞術(shù)(FACS):
由于其發(fā)射波長位于紅光波段,可以與多種其他熒光染料進行多色檢測,不易與自體熒光產(chǎn)生干擾,適合多通道分析。
單分子檢測:
在單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移(smFRET)等研究中,ATTO647N常與ATTO532、Cy3等染料成對使用,用于研究蛋白質(zhì)折疊、分子互作與動力學(xué)。
超分辨率成像:
ATTO647N在STED、PALM和STORM成像中表現(xiàn)出色,尤其因其高光穩(wěn)定性和良好的成像分辨率,被廣泛用于神經(jīng)科學(xué)、細胞骨架、膜蛋白等研究領(lǐng)域。
使用方法建議
溶液配制:
NHS酯對水分敏感,使用前應(yīng)在無水DMSO或DMF中溶解,推薦使用濃度為1–10 mM,現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)記反應(yīng)條件:
一般在 pH 7.5–8.5 范圍(例如碳酸鹽緩沖液或HEPES緩沖液)中進行標(biāo)記,反應(yīng)時間通常為30分鐘至2小時,反應(yīng)完成后需使用透析、層析或超濾等方式去除未反應(yīng)的染料。
儲存建議:
未開封粉末需避光、干燥儲存于-20℃或更低;溶液狀態(tài)下不建議長期保存,最好分裝凍存避免多次凍融。
相關(guān)推薦:
1351519-86-2,ATTO647n 活性酯,Atto647n NHS
IR-800CW-NHS,956579-01-4,IR800 NHS活性酯
FITC,518-45-6,F(xiàn)luorescin,fitc,溶劑黃94,F(xiàn)luorescein
1418217-95-4,DBCO-Biotin,二苯并環(huán)辛炔-生物素
80724-19-2,5-TRITC-SCN,四甲基羅丹明-5-異硫氰酸酯
1215204-46-8,N-丙炔氧羰基-L-賴氨酸
5-FAM NH2,138589-19-2,F(xiàn)AM amine, 5-isomer,熒光素染料
Fitc-TSA,210236-90-1,FITC Tyramide