結(jié)構(gòu)功能與化學(xué)特性
1. 熒光素部分(Fluorescein/FITC)
熒光素是一種綠色熒光染料,具有以下優(yōu)點(diǎn):
吸收峰 ~490 nm,發(fā)射峰 ~520 nm;
在生物體內(nèi)穩(wěn)定,可在 pH 6–8 范圍內(nèi)維持高量子產(chǎn)率;
與光學(xué)成像系統(tǒng)高度兼容;
結(jié)構(gòu)上的羧酸和異硫氰酸基便于偶聯(lián)到胺類目標(biāo)分子。
2. DBCO 部分(Dibenzocyclooctyne)
DBCO 是一種具強(qiáng)環(huán)張力的炔類化合物,能快速參與應(yīng)變促成的銅離子無催化點(diǎn)擊反應(yīng)(SPAAC),即:
DBCO + Azide → Triazole(無需金屬離子催化)
該反應(yīng)的特點(diǎn)是:
快速、高效、特異性高;
在生理?xiàng)l件下無需金屬催化劑,對活細(xì)胞和生物體友好;
廣泛用于細(xì)胞表面修飾、標(biāo)記生物分子等。
應(yīng)用領(lǐng)域
FITC-DBCO 屬于功能性熒光探針,在生命科學(xué)研究中有諸多用途,特別適用于:
1. 生物正交標(biāo)記(Bioorthogonal Labeling)
可與含有疊氮基團(tuán)(–N?)的分子進(jìn)行選擇性標(biāo)記;
被廣泛用于:
多糖、糖類探針(如azido-sugar)標(biāo)記;
蛋白質(zhì)生物正交修飾;
細(xì)胞膜表面成像;
納米;蚩贵w的功能化。
2. 活細(xì)胞成像
熒光素部分賦予其強(qiáng)的熒光成像能力;
因DBCO與疊氮反應(yīng)無需金屬催化,特別適合活細(xì)胞環(huán)境下進(jìn)行標(biāo)記;
可進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地觀測目標(biāo)生物分子的定位與轉(zhuǎn)運(yùn)。
3. 熒光示蹤與追蹤
可用于藥物、DNA、RNA、脂質(zhì)體等攜帶系統(tǒng)的熒光標(biāo)記;
監(jiān)測其在細(xì)胞或體內(nèi)的輸運(yùn)、分布和清除過程;
也常用于評估納米載體靶向性或細(xì)胞攝取能力。
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