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          CY3.5-Isomaltose,CY3.5標(biāo)記異麥芽糖的合成步驟
          發(fā)布時(shí)間:2025-07-25     作者:axc   分享到:

          CY3.5-Isomaltose,CY3.5標(biāo)記異麥芽糖的合成步驟

          CY3.5標(biāo)記異麥芽糖(CY3.5-Isomaltose)是一種由兩個(gè)葡萄糖單元通過(guò) α-(1→6) 糖苷鍵連接的二糖結(jié)構(gòu),通過(guò)共價(jià)引入紅色熒光染料Cy3.5后,可作為簡(jiǎn)明糖類熒光探針用于生物識(shí)別。其合成步驟可分為如下幾個(gè)階段:

          步:異麥芽糖的獲取

          異麥芽糖可通過(guò)對(duì)淀粉或麥芽糖進(jìn)行酶解反應(yīng)獲得,使用轉(zhuǎn)葡萄糖苷酶(如Dextranse)可特異性產(chǎn)生α-1,6二糖。純化過(guò)程包括:

          活性炭脫色;

          凝膠過(guò)濾柱(如Sephadex G-10)分離;

          HPLC或TLC檢測(cè)確認(rèn)純度。

          第二步:糖分子修飾

          糖類缺乏可反應(yīng)的氨基團(tuán),需進(jìn)行化學(xué)修飾。常采用還原胺化法,使用乙二胺或肼將糖分子還原端醛基轉(zhuǎn)化為胺基。例如,將異麥芽糖與乙二胺及NaBH?CN共溫育8小時(shí),引入伯胺結(jié)構(gòu)。

          第三步:Cy3.5染料的引入

          選用Cy3.5-NHS酯型染料,其對(duì)伯胺反應(yīng)具有良好的專一性。將其溶解在DMSO中后緩慢加入到含修飾糖的PBS緩沖液中,在避光、pH 8.0條件下反應(yīng)4~6小時(shí),形成穩(wěn)定的酰胺鍵連接。

          第四步:產(chǎn)物純化

          采用透析(MWCO 1000 Da)或C18固相萃取法去除未反應(yīng)的Cy3.5。終使用HPLC驗(yàn)證產(chǎn)物純度,檢測(cè)吸收峰(570 nm)與糖信號(hào)共同存在。

          第五步:性質(zhì)確認(rèn)

          通過(guò)UV-Vis譜圖(確認(rèn)Cy3.5標(biāo)記)與質(zhì)譜(確認(rèn)糖鏈質(zhì)量)分析判斷偶聯(lián)效果;并可通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀初步應(yīng)用驗(yàn)證。

          產(chǎn)品名稱:CY3.5-Isomaltose,CY3.5標(biāo)記異麥芽糖

          純度:95%+

          性狀:固體或液體

          儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存

          包裝規(guī)格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

          CY3.5-Isomaltose

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          推薦產(chǎn)品:

          CY3-SCTSM 花菁染料CY3標(biāo)記SCTSM多肽

          CY3-SH 巰基cy3

          CY3-SS-31 花菁染料CY3標(biāo)記靶向肽

          CY3-Streptavidin CY3標(biāo)記鏈霉親和素

          CY3-Substance P 花菁染料CY3標(biāo)記神經(jīng)肽Substance P

          僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.06.23


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