Sulfo-NHS-Biotin|cas119616-38-5|生物素 3-磺酸基-N-羥基琥珀酰亞胺鈉鹽 生物素化試劑

英文名稱:Sulfo-NHS-Biotin

中文名稱:生物素 3-磺酸基-N-羥基琥珀酰亞胺鈉鹽

MF:C14H18N3NaO8S2

MW:443.43

CAS:119616-38-5

Sulfo-NHS-Biotin (N-羥基磺酸基琥珀生物素)是一種胺反應(yīng)性的生物素化試劑。較常見的胺反應(yīng)性生物素化試劑可分為兩種，N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）酯和羧酸鹽。通常，NHS酯-生物素化試劑包含反應(yīng)性的NHS環(huán)結(jié)構(gòu)，可以與蛋白或其它分子羰基上的胺反應(yīng)，通過親核攻擊形成穩(wěn)定的酰胺鍵，并釋放NHS基團(tuán)。由于NHS-biotin在水溶液中的不溶性，通過在NHS環(huán)結(jié)構(gòu)上加入一個(gè)帶負(fù)電荷的磺酸基，從而獲得NHS-biotin的水溶性類似物sulfo-NHS-biotin。Sulfo-NHS-Biotin可以直接加入到反應(yīng)性水溶液中，而不需要提前溶解在有機(jī)溶劑中。

試驗(yàn)操作

生物素化方法:    

樣品：THUMPa 蛋白

溶解方法：可以溶于水中。

反應(yīng)條件：2 mM, 室溫反應(yīng)30 min

應(yīng)用：用含50 mM NaCl 的濃度為50 mM的K2HPO4/KH2PO4 緩沖液 （pH 7.5）將Sulfo-NHS-biotin溶解成 2 mM 的溶液。它可以立即用于分離試驗(yàn)中對(duì)濃度為1.66 nmol 的THUMPa蛋白進(jìn)行標(biāo)記。在室溫下孵育30 min完成標(biāo)記反應(yīng)。反應(yīng)完成后，樣品用50 mM K2HPO4/KH2PO4 緩沖液（pH 7.5，含50 mM NaCl）透析15分鐘。與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的生物素 可以用鏈霉素結(jié)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。