明膠納米顆粒的制備方法主要包括去溶劑法、反相微乳法、凝聚相分離法、乳化溶劑蒸發(fā)法、層層涂層法、自聚集和納米沉淀法,我們制得的明膠納米顆粒粒徑范圍通常為200~400nm。
我們以B型明膠為原料,戊二醛為交聯(lián)劑,通過改進的兩步去溶劑法制備了較小粒徑(約100nm)的明膠納米顆粒(Gelatinnanoparticles,GNPs)
明膠納米顆粒(Gelatinnanoparticles,GNPs)的制備方法
制備明膠納米顆粒采用改進的二次去溶劑法,實驗保持溫度40℃和pH=12的優(yōu)化條件,本文主要是改變了二次分散體系的濃度。操作如圖1所示。
**于反應(yīng)器中加入約25mL去離子水配制成50g/L的明膠溶液,充分溶解后加入25mL去溶劑化試劑丙酮,反應(yīng)體系會出現(xiàn)分層,分離得到的上層乳白色分散液即含有高相對分子質(zhì)量明膠。然后將其再溶于去離子水中,變化加入的水量,使明膠在分散體系中的質(zhì)量濃度分別為5.0、8.0、10.0、12。5g/L。使用1mol/LNaOH調(diào)節(jié)pH=12,使明膠分子遠離等電點,接著邊攪拌邊滴加丙酮,待混合液再次變?yōu)槿榘咨。然后加入一定量的戊二醛交?lián)明膠形成穩(wěn)定顆!灿洖x-GNPs,其中x為m(戊二醛)/m(明膠)〕,持續(xù)攪拌16h利于反應(yīng)液分散(比文獻延長4h以上)。進一步將分散液過濾、冷凍離心、揮發(fā)去除丙酮及冷凍干燥后,即得明膠納米顆粒GNPs產(chǎn)物。
明膠納米顆粒GNPs的粒徑測試
將制備的明膠納米顆粒分散液用去離子水稀釋至GNPs質(zhì)量濃度為0。1g/L,然后采用激光光散射粒度儀在25℃下測試明膠納米顆粒的粒徑,檢測角度為90°。
圖2是交聯(lián)劑戊二醛用量不同時所制備GNPs(4.5%-GNPs、9.0%-GNPs、13.5%-GNPs、18.0%-GNPs、27.0%-GNPs)分散液的光學(xué)照片?梢钥闯觯宦(lián)劑戊二醛用量不同時GNPs分散液均呈粉紅色,且隨著交聯(lián)劑用量的增加顏色也略微加深。這是因為,明膠分子鏈上賴氨酸殘基的游離氨基與戊二醛上的醛基發(fā)生Schiff堿反應(yīng),生成的生色基團醛亞胺(CHN)發(fā)生共軛效應(yīng)而引起的。隨著交聯(lián)度的增加,醛亞胺基團的數(shù)量增多,因此分散液的顏色也逐漸變深。實驗發(fā)現(xiàn),GNPs分散液在儲存溫度4℃條件下儲存6個月后,均未出現(xiàn)分層或沉淀現(xiàn)象,表明此方法制備的明膠納米顆粒GNPs具有較好的儲存穩(wěn)定性。
明膠納米顆粒GNPs的AFM形貌結(jié)構(gòu)
圖6a和6b分別是GNPs(交聯(lián)劑戊二醛用量為4。5%)的AFM形貌結(jié)構(gòu)高度圖和三維高度圖。結(jié)果顯示,納米顆粒直徑為50~150nm,表面較光滑。對三維高度圖及高度圖進行局部數(shù)據(jù)分析均表明,納米顆粒在云母基底上的高度并不完全一致,其平均垂直高度值約為10nm,其直徑與高度值之間的差異反映了GNPs具有柔軟性。另外,從圖6中還可以看出,顆粒分布較為均勻且無明顯聚集體產(chǎn)生,這也表明了制備方法的可行性。
圖7a和7b分別是明膠納米顆粒GNPs的TEM形貌圖和單個顆粒的放大圖,從圖7中可以看出,明膠納米顆粒呈光滑球形,尺寸約為90nm,且顆粒尺寸分布較為均勻,表明GNPs為非均質(zhì)納米顆粒。
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鏈霉親和素修飾的四氧化三鐵磁性納米顆粒(SA@Fe3O4)
聚乙烯亞胺修飾的四氧化三鐵磁性納米顆粒(PEI@Fe3O4)
PEG化四氧化三鐵磁性納米顆粒(羧基末端)
巰基修飾的二氧化硅納米顆粒(SH-SiO2-Particles)
FITC熒光標(biāo)記的標(biāo)記的納米金顆粒(FITC-Au-NPs)
生物素修飾的金納米顆粒(Biotin-Au-NPs)
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以上資料來自小編axc,2022.03.07
以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體。