本文為一種具有靶向長循環(huán)的多級仿生納米物載體的制備方法。一種具有靶向長循環(huán)的多級仿生納米物載體的制備方法，包括：

(1)制備介孔二氧化硅；

(2)將藥物負(fù)載到介孔二氧化硅；

(3)采用生物素修飾紅細(xì)胞膜；

(4)將生物素修飾后的紅細(xì)胞膜包裹負(fù)載藥物的介孔二氧化硅。

具體操作步驟如下：

(1)制備介孔二氧化硅

2份正戊醇，4份TEOS(正硅酸乙酯)加入到30份環(huán)己烷中攪拌均勻，加入2.4份CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)和30份去離子水，攪拌后轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，置于120℃烘箱里反應(yīng)2小時，用去離子水洗滌三次，至于70℃空氣中干燥一天得到白色粉末，然后550℃馬弗爐燒結(jié)6h，即可得白色粉末的介孔二氧化硅(MSN)。

(2)制備負(fù)載藥物DOX的介孔二氧化硅：

將介孔二氧化硅和藥物DOX加入到水中(介孔二氧化硅、藥物DOX和水的質(zhì)量比為5:1：20)，攪拌12h，通過靜電作用負(fù)載上藥物，得負(fù)載藥物的介孔二氧化硅(MSN-DOX)。

3)制備紅細(xì)胞膜：

全血采自雄性Balb/c小鼠。將采集的紅細(xì)胞立即分散在PBS(pH＝7。4)中，脹破，離心分離，得到紅細(xì)胞膜碎片(RBCm)。

(4)對紅細(xì)胞膜進(jìn)行生物素修飾：

將1份二硬脂�；�磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素(Bio-PEG-DSPE)與5份破碎的紅細(xì)胞膜，在4℃下攪拌過夜，用微型擠出機(jī)通過200nm濾膜連續(xù)擠出，得生物素修飾后的紅細(xì)胞膜(Bio-RBCm)。

本文技術(shù)方案制得生物素修飾紅細(xì)胞膜包裹的載介孔二氧化硅納米粒子，具有以下的優(yōu)點：

(1)采用的介孔二氧化硅由正硅酸乙酯和十六烷基三甲基溴化銨，再通過高溫煅燒制得，其具有大的比表面積以及豐富孔道結(jié)構(gòu)，主要用于提高物載體的載量。

(2)紅細(xì)胞膜的包裹使其合成的納米粒子可以**的躲避生物屏障，進(jìn)行全身的血液循環(huán)，實現(xiàn)納米粒子在**中的**蓄積。

(3)生物素的修飾使得物載體進(jìn)行主動靶向，進(jìn)一步提高了其在**部位的聚集。本文展現(xiàn)了提高載體生物相容性、長循環(huán)以及在**部位的聚集，可用于**部位物的遞送。

(5)生物素修飾的紅細(xì)胞膜包裹介孔二氧化硅負(fù)載的藥物(Bio-RBCm@MSN-DOX)，將生物素修飾后的紅細(xì)胞膜(Bio-RBCm)和負(fù)載藥物的介孔二氧化硅MSN-DOX)加入到PBS溶液中(生物素修飾后的紅細(xì)胞膜、負(fù)載藥物的介孔二氧化硅和PBS溶液的質(zhì)量比為1:1:40)，在超聲浴中處理30min，充分分散后，用脂質(zhì)體擠出器過濾，得到具有生物素修飾紅細(xì)胞膜包覆的介孔二氧化硅納米粒子。為了提高產(chǎn)品的保質(zhì)期，可以進(jìn)行冷凍干燥。

圖1為Bio?RBCm@MSN?DOX、RBCm@MSN?DOX、RBCm、MSN?DOX的透射電鏡圖，圖a為Bio?RBCm@MSN?DOX透射電鏡圖，比例尺為200納米；圖b為Bio?RBCm@MSN?DOX的高倍透射電鏡圖，比例尺為10納米；c為擠出的紅細(xì)胞膜囊泡的透射電鏡圖，比例尺為200納米；dRBCm@MSN?DOX的透射電鏡圖，比例尺為200納米；

圖2為Bio?RBCm@MSN?DOX、RBCm@MSN?DOX、RBCm vesicle、MSN?DOX粒徑分布圖；

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以上資料來自小編axc,2022.03.07

以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體。