如何用FITC熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì)?FITC標(biāo)記蛋白質(zhì)的操作步驟

　　熒光染料體外標(biāo)記蛋白

　　熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外，目標(biāo)蛋白還可以通過熒光染料標(biāo)記直接進行下游實驗操作，如活體跟蹤、細(xì)胞分選等。

　　FITC熒光標(biāo)記的原理是什么？

　　熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時，它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時，它會發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價結(jié)合在目標(biāo)分子的基團上，利用其熒光特性提供研究對象的信息。

　　FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點:

　　活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團，生成分子探針，并通過熒光成像進行檢測。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時，它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無放射物污染、操作簡單等優(yōu)點，在蛋白質(zhì)功能研究、**篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

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