gus(β-glucuronidase,β-D- 葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一種報(bào)告基因,其表達(dá)產(chǎn)物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS)是一種水解酶,能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水解,它可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯(X-gluc.htm' target=_blank>x-gluc)分解為藍(lán)色的物質(zhì),其檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏、穩(wěn)定,且背景活性低。因?yàn)榻^大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在內(nèi)源的GUS活性,因此gus基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報(bào)告基因,尤其是在研究外源基因瞬時(shí)表達(dá)的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。
Gus染色試劑盒包含GUS染色的全部試劑,使用方便,只需將染色液和緩沖液按照比例混合即配成GUS染色液。該試劑盒可以配制50ml GUS染色液。
Gus染色試劑盒貯存和效期:Gusblue kit
X-gluc染色液-20℃保存;GUS染色緩沖液 4℃貯存。自開(kāi)封之日起**期一年。
使用說(shuō)明:
一. GUS染色液配制:
X-gluc染色液為50×濃縮液,使用前用GUS染色緩沖液稀釋50倍即配成GUS染色液。如0.1 ml X-gluc染色液加入到5 ml GUS染色緩沖液中,即配成5 ml GUS染色溶液。該染色溶液現(xiàn)用現(xiàn)配,短期貯存可以-20℃保存2-3天。
二. GUS染色步驟:
1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時(shí)至過(guò)夜。
2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對(duì)照材料呈白色。
3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色小點(diǎn)即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。
注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和器官的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí),可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞。
產(chǎn)地:西安
廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)