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          熒光素標(biāo)記雙孢蘑菇凝集素(ABL);FITC-ABL,F(xiàn)luorescein labeled Agaricus Bisporus Lectin (ABL)
          發(fā)布時間:2022-04-26     作者:ysl   分享到:

          西安pg電子官方生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。

          雙孢蘑菇凝集素(ABL)是由兩個至四個非常相似的分離蛋白組成,每個四聚體約17 kD亞基。這種凝集素結(jié)合Thomsen-Friedenreich抗原,也稱為T-二糖,半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺。不同于花生凝集素,它不結(jié)合唾液酸化的T抗原,ABL結(jié)合唾液酸化或無唾液酸化的形式。ABL結(jié)合所有血型和IgA亞類的O-連接聚糖。簡單的一糖和二糖只具有輕微的。

          瓊脂糖結(jié)合的雙孢蘑菇凝集素是用我們的親和純化凝集素制備的。以分子量排除極*約為2x107道爾頓的熱穩(wěn)定交聯(lián)4%瓊脂糖微球作為固相基質(zhì),凝集素與之共價偶聯(lián)。小心地控制凝集素在珠子上的附著,以保持凝集素活性,并使結(jié)合凝集素的構(gòu)象變化*小化,這可能導(dǎo)致非特異性的離子或疏水相互作用。我們開發(fā)的技術(shù)將凝集素偶聯(lián)到瓊脂糖珠上,在凝集素和基質(zhì)之間插入親水性間隔臂。

          FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序

          1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;

          2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;

          3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時;

          4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;

          5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。

          6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測組織細胞中的糖成分,陽性部位呈黃綠色熒光。

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