阿霉素偶聯(lián)穿膜肽-聚乙二醇-聚天冬氨酸聚合物(TAT-PEG00-Aspg)的合成路線及表征圖譜

通過多肽固相合成法合成N端為半胱氨酸的八聚天冬氨酸的氨基酸序列(Cys-Aspg)，通過二硫鍵與穿膜肽聚乙二醇(TAT-PEGo00)共價偶聯(lián)，得到穿膜肽~聚乙二醇-聚天冬氨酸聚合物(TAT-PEG00-Aspg),并對其進(jìn)行表征。隨后將阿霉素化學(xué)偶聯(lián)到穿膜肽-聚乙二醇聚天冬氨酸上，形成了兩親性材料(TAT-PEG-Asp8-Dox)。

合成制備方法及表征圖譜：

穿膜肽-聚乙二醇聚天冬氨酸的合成主要利用穿膜肽-聚乙二醇的巰基與聚天冬氨酸序列N-端半胱氨酸的巰基發(fā)生反應(yīng)。將穿膜肽-聚乙二醇(TAT-PEG00o-SH)充分溶于PBS(pH8.0)中,加入Ellman試劑與巰基室溫反應(yīng)1h。肝素柱除去過量的Ellman.試劑和副產(chǎn)物，再加入溶解于PBS的Cys-Asp8，室溫反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束，肝素柱進(jìn)行純化，除去過量的Cys-Asp8，脫鹽柱脫鹽，凍干，得白色粉末TAT-PEG-Aspso ，稱取一定 量的穿膜肽聚乙二醇~聚天冬氨酸，溶解于無水甲醇中，加入NHS和EDC:HC1作縮合劑，反應(yīng)30 min。阿霉素(Dox)溶于甲醇，滴加到上述反應(yīng)液中，室溫反應(yīng)過夜。反應(yīng)結(jié)束后，冰乙醚沉淀，離心，干燥，得TAT-PEG-Asp8-Dox,為紅色粉末。

阿霉素偶聯(lián)穿膜肽-聚乙二醇-聚天冬氨酸聚合物(TAT-PEG00-Aspg)的合成路線

阿霉素偶聯(lián)穿膜肽-聚乙二醇-聚天冬氨酸聚合物(TAT-PEG00-Aspg)的表征圖譜