西安pg電子官方生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時(shí)提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。
凝集素(Lectin)是指一種從各種植物,無(wú)脊椎動(dòng)物和高等動(dòng)物中提純的糖蛋白或結(jié)合糖的蛋白,因其能凝集紅血球(含血型物質(zhì)),故名凝集素。常用的為植物凝集素(Phytoagglutin,PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麥胚素(Wheat germ agglutinin,WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin,PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin,SBA)等,凝集素是它們的總稱。凝集素可以作為一種探針來(lái)研究細(xì)胞膜上特定的糖基。另一方面,凝集素具有多價(jià)結(jié)合能力,能與FITC熒光素、生物素、酶、膠體金和鐵蛋白等示蹤物結(jié)合,從而在光鏡與/或電鏡水平顯示其結(jié)合部位。通常采用熒光素、辣根過(guò)氧化物酶、鐵蛋白、膠體金、Cyanine或生物素等對(duì)其進(jìn)行標(biāo)記。
目前已有熒光素異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,F(xiàn)ITC)、辣根過(guò)氧化物酶和生物素標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色。近期,pg電子官方生物公司推出了Cyanine染料標(biāo)記的凝集素新品Cyanine Dye Conjugated Lectin。與傳統(tǒng)的熒光染料基團(tuán)相比,Cyanine染料具有更強(qiáng)的熒光,且熒光不宜猝滅。這類Cyanine標(biāo)記凝集素產(chǎn)品的問(wèn)世,為廣大的凝集素用戶提供了更廣泛的選擇范圍。
Cy3共軛物可使用帶有羅丹明(TRITC)過(guò)濾器的熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。但Cy5共軛物通常使用配備有遠(yuǎn)紅外光譜成像的共聚焦顯微鏡來(lái)進(jìn)行觀察。
這些Cyanine標(biāo)記的凝集素旨在用于鑒定細(xì)胞和組織切片上的糖蛋白表達(dá)。此類產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于免疫熒光和流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中。
翅莢百脈根凝集素(LTL)是一個(gè)密切相關(guān)的糖蛋白家族,對(duì)含有α-連接L-巖藻糖的低聚糖具有相似的特異性。盡管翅莢百脈根凝集素(LTL)的許多結(jié)合性質(zhì)與歐洲烏賊凝集素I相似,但這些巖藻糖特異性凝集素對(duì)低聚糖的結(jié)合親和力和某些特異性有**差異。
熒光素標(biāo)記的翅莢百脈根凝集素(LTL)具有適當(dāng)數(shù)量的熒光色素結(jié)合,為該凝集素提供*的染色特性。這種共軛物基本上不含未結(jié)合的熒光色素。激發(fā)*值為495 nm,發(fā)射*值為515 nm。
FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序
1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;
2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;
3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時(shí);
4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;
5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。
6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細(xì)胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測(cè)組織細(xì)胞中的糖成分,陽(yáng)性部位呈黃綠色熒光。
注意事項(xiàng)
(1)固定液:以Bouin固定液為佳,也可用70%乙醇固定;
(2)與其他組織化學(xué)方法一樣,染色過(guò)程中,應(yīng)始終保持一定濕度,使切片保持濕潤(rùn)狀態(tài);
(3)需經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定FITC-凝集素的*佳工作濃度;
(4)凝集素的活性部位需重金屬離子維持,故可用TBS作為緩沖液,加微量的金屬(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增強(qiáng)凝集素的結(jié)合能力。
相關(guān)產(chǎn)品
翅莢百脈根凝集素(LTL) LTL
熒光素標(biāo)記的翅莢百脈根凝集素(LTL) FITC-LTL
生物素化翅莢百脈根凝集素(LTL) Biotin生物素-LTL
瓊脂糖結(jié)合翅莢百脈根凝集素(LTL) Agarose bound瓊脂糖-LTL
可以根據(jù)文獻(xiàn)制備特殊定制類產(chǎn)品。(ysl2022.4.27.)
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