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神經(jīng)纖維是由神經(jīng)元的軸突和樹突等成分組成,經(jīng)過銀染后再用還原劑處理,使銀顆粒沉著于纖維和細胞中.神經(jīng)元及神經(jīng)纖維的染色方法種類較多,但大多采用鍍銀法.常用于神經(jīng)組織的和研究.

免疫染色處理實驗開始前，將－20℃冰箱里試劑盒中的試劑置入冰槽里融化。然后進行下列操作：

1． 準(zhǔn)備好待測的厚為50 微米的冰凍切片

2． 小心加上xx 微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4． 小心加上xx 微升－20℃預(yù)冷的固著液（Reagent B），鋪滿整個切片樣品表面

5． 置于－20℃冰箱里孵育20 分鐘

6． 小心移去切片上的固著液（Reagent B）

7． 空氣中晾干

8． 加上xx 微升清理液（Reagent A），鋪滿切片樣品表面

9． 室溫下孵育2 分鐘

10．小心抽去清理液（Reagent A）

11．加上xx 微升封阻液（Reagent C），鋪滿切片樣品表面

12．置于37℃培養(yǎng)箱里孵育30 分鐘，保持濕潤

13．小心抽去封阻液（Reagent C）

14．加上xx 微升抗體液（Reagent D），鋪滿切片樣品表面

15．蓋上蓋玻片，置于37℃培養(yǎng)箱里孵育30 分鐘（注意：避免氣泡）

16．小心移去蓋玻片，抽去抗體液（Reagent D）

17．加上xx 微升清理液（Reagent A），鋪滿切片樣品表面

18．置于37℃培養(yǎng)箱里孵育5 分鐘，保持濕潤

19．小心抽去清理液（Reagent A）

20．重復(fù)實驗步17~19 二次

21．加上xx 微升熒光液（Reagent E），鋪滿切片樣品表面

22．蓋上新的蓋玻片，置于37℃培養(yǎng)箱里孵育30 分鐘，避免光照（注意：避免氣泡）

23．小心移去蓋玻片，抽去染色液（Reagent E）

24．加上xx 微升清理液（Reagent A），鋪滿切片樣品表面

25．置于37℃培養(yǎng)箱里孵育5 分鐘，保持濕潤

26．小心抽去清理液（Reagent A）

27．加上xx 微升抗淬滅液（Reagent F）

28．蓋上蓋玻片或封片

29．即刻在熒光顯微鏡下觀察3

熒光液（Reagent E）

熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC）

熒光顏色綠色

激發(fā)波長488

散發(fā)波長530

作用神經(jīng)纖維顯示

產(chǎn)地：西安

儲存時間：1年

保存：冷藏

用途：科研

廠家：西安pg電子官方生物科技有限公司