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一、概述

Epoxy 活化瓊脂糖磁珠（Magarose-Epoxy）是的活化好的磁珠，它采用平均粒徑為20-45μm 的6%高度交聯(lián)瓊脂糖凝膠，表面用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性，用它合成的親和磁珠，它避免蛋白之間位阻以及蛋白和填料的位阻干擾，使其同等配基下有更高載量，同時(shí)有更好的分辨率。由于比表面積大，平衡和洗脫的時(shí)間也更短。它經(jīng)過(guò)接枝即使是純化病毒，抗體等大分子的物質(zhì)，載量基本保持不變�？梢栽谒�相或者有機(jī)相中偶聯(lián)，提供的該Epoxy 瓊脂糖磁珠已經(jīng)完全溶脹為即用凝膠磁珠。

二、產(chǎn)品特性

注：磁珠蛋白結(jié)合量與目標(biāo)蛋白特性相關(guān)，此處僅作參考值。

三、使用方法

1. 產(chǎn)品特點(diǎn)

  偶聯(lián)條件溫和（pH8-10，溫度4-45℃，時(shí)間1-16小時(shí)，可以在水相或有機(jī)相中偶聯(lián)），偶聯(lián)效率高（配基密度60-70 μmol/mL）。

  磁珠不需要處理，直接計(jì)算合適的量用于偶聯(lián)，縮短時(shí)間。

  保存時(shí)間長(zhǎng)，-20℃可以保存2年，不能夠受潮。

  剛性強(qiáng)，流速快(300 cm/h，100 kpa)。

 可偶聯(lián)含有氨基、巰基、羥基的多糖，蛋白，核酸，抗體等配基，應(yīng)用范圍廣。

 偶聯(lián)后制備的親和填料壽命長(zhǎng)，流速快，特異性高。

2. 蛋白偶聯(lián)操作步驟

以用該Epoxy 瓊脂糖磁珠偶聯(lián)牛血清白蛋白（BSA）為例：

1)        取20 ml活化瓊脂糖磁珠，磁分離，50ml去離子水洗滌三次。磁分離，去除上清。

2)        取BSA 100 mg 溶解于10 mL的pH9.0的 0.25M 碳酸鈉緩沖液中。

3)        將BSA 溶液加入磁珠中混合，在搖床上振蕩，25℃偶聯(lián)6小時(shí)。

4)        然后加50 mg 甘氨酸，再反應(yīng)6個(gè)小時(shí)封閉剩余的基團(tuán)。

5)        偶聯(lián)了BSA 的磁珠，用1 M NaCl 溶液洗3-5次，收集偶聯(lián)后剩余的液體以及洗滌的溶液測(cè)定BSA 的總量，再用純水洗滌磁珠3次，最后將磁珠保存在相應(yīng)蛋白保存緩沖液中。

6)        BSA 的偶聯(lián)量為25 mg/ml. 計(jì)算方法：BSA 的吸附載量=（G0—G1）/V。

G0：BSA 總使用量，單位：mg；

G1：偶聯(lián)反應(yīng)后未偶聯(lián)的 BSA 的量，單位：mg；

V：填料的體積，單位：mL；

注：該偶聯(lián)方法可用于偶聯(lián)單抗及其它蛋白，均能獲得很好的偶聯(lián)效果。偶聯(lián)的物質(zhì)如果是小分子的例如氨基酸或其他帶-NH₂、-SH、-OH等基團(tuán)的小分子配基，那可以直接把配基加到0.05M NaOH中配置成10-20mg的溶液，其他條件不變。也可以提高偶聯(lián)的溫度，這樣可以偶聯(lián)密度更高。