小鼠體內(nèi)光學(xué)成像的原理和實(shí)驗(yàn)步驟-pg電子官方生物
西安pg電子官方生物科技有限公司在整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)服務(wù),動(dòng)物造模實(shí)驗(yàn),動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)及造模服務(wù)、細(xì)胞周期測(cè)試、細(xì)胞凋亡測(cè)試、藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包等方面有豐富的經(jīng)驗(yàn)。提供多種小鼠,大鼠,兔子等動(dòng)物的活體成像,為您定制**的實(shí)驗(yàn)方案。
活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因(Luciferase)標(biāo)記細(xì)胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用綠色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等熒光報(bào)告基因和FITC、Cy5、Cy7等熒光素及量子點(diǎn)(quantumdot,QD)進(jìn)行標(biāo)記。
一、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像技術(shù)主要有幾種標(biāo)記方法。
生物發(fā)光 | 1.熒光素酶基因標(biāo)記 | 熒光素酶基因(Luciferase)標(biāo)記細(xì)胞或DNA |
熒光發(fā)光 | 1.熒光蛋白標(biāo)記 | 熒光蛋白適用于標(biāo)記細(xì)胞、病毒、基因等,通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed) |
2.熒光染料標(biāo)記 | 熒光染料標(biāo)記和體外標(biāo)記方法相同,常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7,可以標(biāo)記抗體、多肽、小分子藥物等 | |
3.量子點(diǎn)標(biāo)記 | 量子點(diǎn)作為一類新型的熒光標(biāo)記材料,其在長(zhǎng)時(shí)間生命活動(dòng)監(jiān)測(cè)及活體示蹤方面具有獨(dú)特的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。 |
二、小鼠體內(nèi)光學(xué)成像的原理:
小動(dòng)物活體成像技術(shù)是采用高靈敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,使得可以直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為。通過對(duì)同一組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行記錄,跟蹤統(tǒng)一觀察目標(biāo)(標(biāo)記細(xì)胞及基因)的移動(dòng)及變化。操作簡(jiǎn)單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高,已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等發(fā)面。**學(xué)領(lǐng)域:建立**模型,通過活體成像技術(shù)可以測(cè)量**的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移以及對(duì)藥物的反應(yīng),使**學(xué)更接近臨床的發(fā)病的微觀環(huán)境。相比傳統(tǒng)方法,不僅靈敏度提高(檢測(cè)到微小**病灶),而且適合于**體內(nèi)生長(zhǎng)的定量分析,避免由于宰殺老鼠而造成的組間差異。藥物研究:通過活體成像技術(shù)可研究與藥物代謝有關(guān)的基因,藥物作用通路以及藥物的靶向臟器和體內(nèi)分布規(guī)律。
三、服務(wù)流程
1、制作動(dòng)物模型
2、細(xì)胞標(biāo)記或動(dòng)物標(biāo)記
3、活體成像
4、數(shù)據(jù)處理
四、提供一種小鼠活體成像的實(shí)驗(yàn)步驟:
1).SPF級(jí) BALB/C裸鼠,6~8 周齡,18~20克,實(shí)驗(yàn)前24 h 自由進(jìn)食、飲水。
2).于實(shí)驗(yàn)裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動(dòng)物。將裸鼠俯臥位平放于小動(dòng)物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。實(shí)驗(yàn)時(shí)將Cy7或Cy7標(biāo)記的生物分子或藥物溶于水(或甲醇/乙醇/乙二醇,有時(shí)DMSO 200uL能把小鼠殺死)稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL(濃度0.5 mg/mL)[用量和時(shí)間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化]。每5min 記錄1 張動(dòng)物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對(duì)照鼠不注射藥物,進(jìn)行同時(shí)記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器,進(jìn)行成像。
3).Cy7 檢測(cè)時(shí)激發(fā)波長(zhǎng)700~770 nm帶通,發(fā)射波長(zhǎng)790 nm長(zhǎng)通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780~950 nm,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時(shí)間為500 ms。
結(jié)果說明:不同的藥物代謝時(shí)間不一樣,注射入裸鼠體內(nèi),熒光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈現(xiàn)**的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6小時(shí),快的只有30分鐘;如果是骨骼和鼻腔等部位靶點(diǎn)的Cy7標(biāo)記藥物,有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測(cè)到熒光成像。器官切片觀察:將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小時(shí)以上,0%,20%,30%PBS蔗糖依次沉底,20μm切片,多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片,晾干,DAPI染色。共聚焦顯微鏡觀察,激光器為氦氖 633 nm。
西安pg電子官方生物提供以下定制服務(wù)項(xiàng)目列表:
●藥物代謝動(dòng)學(xué)參數(shù)分析
●大小鼠高脂血癥模型造模
●大小鼠I型糖尿病模型造模
●大鼠脊髓損傷模型造模
●肝細(xì)胞代謝穩(wěn)定性試驗(yàn)
●基因芯片分析
●藥代體外的吸收、分布、代謝和排泄研究
●藥動(dòng)代謝物鑒別/分析
●細(xì)胞誘導(dǎo)/分化實(shí)驗(yàn)外包
●血漿動(dòng)力學(xué)檢測(cè)
●組織分布研究
●細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
●細(xì)胞增殖與活性實(shí)驗(yàn)
●創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)動(dòng)物模型●基因敲除技術(shù)
●藥代動(dòng)力學(xué)體外安全性評(píng)價(jià)
●血漿蛋白結(jié)合率測(cè)定
●血漿穩(wěn)定性試驗(yàn)
●肝微粒體代謝試驗(yàn)
●CYP450**試驗(yàn)
●CYP450誘導(dǎo)試驗(yàn)
●代謝產(chǎn)物推測(cè)
●代謝產(chǎn)物確證
●代謝途徑的推測(cè)
●代謝途徑的確證
●跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)
●藥物-藥物相互作用
●代謝表型研究
●環(huán)孢素mPEG-PLGA嵌段共聚物膠束在大鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)外包
●對(duì)乙酰氨基酚在大鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●丹酚酸B單體在正常大鼠和高脂血癥大鼠體內(nèi)的藥代外包
●熱毒寧注射液在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)外包
●梔子苷單體在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)外包
●水飛薊賓口服亞微乳劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)外包
●18α-甘草酸二銨對(duì)格列本脲在實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠體內(nèi)藥代實(shí)驗(yàn)
●奈韋拉平納米混懸液在小鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)外包
●氟比洛芬微乳在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●半乳糖神經(jīng)酰胺脂質(zhì)體包封的齊多夫啶(azidothymidine,AZT)在小鼠體內(nèi)的藥代外包
●克拉霉素對(duì)替硝唑在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)外包
●奧沙利鉑聚乙二醇修飾脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)
●京尼平苷酸(GPA)在膽汁淤積型大鼠體內(nèi)的藥代外包
●小檗堿(BBR)在大鼠血漿內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●8-十六烷基小檗堿(8-BBR-C16)在大鼠血漿內(nèi)的藥動(dòng)外包
●奧硝唑(ONZ)在重癥急性胰腺炎(SAP)小鼠體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)外包
●奧硝唑(ONZ)在)小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)外包
●(modafinil,MOD)在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)參數(shù)檢測(cè)
●葛根芩連湯中小檗堿在糖尿病模型大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●酮洛芬(KPF)脂質(zhì)體凝膠在大鼠體內(nèi)的藥代外包
●金森腦泰注射液(CBN)中葛根素在正常大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)外包
●金森腦泰注射液(CBN)中人參皂苷 Rg1在正常大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)參數(shù)檢測(cè)
●川芎嗪醇質(zhì)體貼片在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●(modafinil,MOD)在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)參數(shù)檢測(cè)
●氨溴索對(duì)多索茶堿(DP)在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●齊墩果酸納米脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)外包
●口服丁香酚在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●四神丸水煎液中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)外包
●乳糖化-去甲斑蝥素納米粒在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●磷酸咯萘啶在小鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)參數(shù)檢測(cè)
●鹽酸奧昔布寧凝膠劑與片劑在大鼠體內(nèi)的藥代外包
●五柴顆粒中五味子在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)外包
●黃連-吳茱萸配伍中鹽酸小檗堿在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●塞來昔布納米混懸劑(CXB-NSs)在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)外包
●原兒茶酸在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)外包
●康艾注射液和苦參素注射液在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)外包
●馬兜鈴酸在大鼠體內(nèi)藥代學(xué)外包
●內(nèi)脂質(zhì)體干擾素在小鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)外包
●鹽酸戊乙奎醚在小鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)外包
●天麻素在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究外包
●綠原酸在大鼠體內(nèi)的藥代學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●黃芩苷在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究外包
●(ephedrine,E)在小鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究外包
●銀杏葉提取物含藥血清在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)外包
●脾虛癥大鼠甘草甜素的藥動(dòng)外包
●芒果苷自微乳給藥系統(tǒng)在大鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)
●替莫唑胺固體脂質(zhì)納米粒在小鼠體內(nèi)藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)
●甲氨蝶呤紅細(xì)胞載體在大鼠體內(nèi)藥代實(shí)驗(yàn)
●環(huán)孢素固體分散體在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)外包
●3-O-蕓香糖苷在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)檢測(cè)
●白芍總苷在免疫性肝損傷小鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)
●大川芎方多元釋藥系統(tǒng)在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)參數(shù)檢測(cè)
●殼聚糖包覆左旋多巴脂質(zhì)體凍干制劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)外包
●西咪替丁對(duì)大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)檢測(cè)
●低氧與常氧狀態(tài)下羅紅霉素在大鼠體內(nèi)的藥代外包
●鹽酸阿霉素殼聚糖納米粒在大鼠腦內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)外包
●低分子量肝素凝膠對(duì)瘙癢模型小鼠的藥代參數(shù)檢測(cè)
●芹菜素囊泡在小鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●重組水蛭素在大鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)外包
●鹽酸川芎嗪(TMP)經(jīng)大鼠鼻腔給藥后的腦內(nèi)藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)
●知母皂苷B-II在SD大鼠體內(nèi)的藥代實(shí)驗(yàn)參數(shù)檢測(cè)
●吳茱萸堿脂質(zhì)體在大鼠體內(nèi)的藥代
●冬凌草甲素在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)
●大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)外包
●膽固醇-半乳糖配體介導(dǎo)的多烯紫杉醇脂質(zhì)體大鼠體內(nèi)藥代外包
●紫杉醇納米混懸劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)外包
●淡豆豉中異黃酮成分在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●黃芩素在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)外包
●苦參堿在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)外包
●尼莫地平前體脂質(zhì)體在小鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
●鹽酸伊立替康納米粒(irinotecan hydrochloride nanoparticles,CPT-11NPs)在大鼠體內(nèi)的藥代參數(shù)檢測(cè)
溫馨提示:西安pg電子官方生物供應(yīng)的化學(xué)試劑、納米材料、藥動(dòng)學(xué)外包產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體